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利用细胞壁锚定蛋白MbA构建新型苏云金芽胞-华中农业大学学报
第 卷 第 期 华 中 农 业 大 学 学 报
33 1 Vol.33 No.1
年 月 ,
2014 1 JournalofHuazhon A riculturalUniversit Jan.20147~11
g g y
利用细胞壁锚定蛋白MbA 构建
新型苏云金芽胞杆菌表面展示系统
吕 婷 沈 霏 邵小虎 李 华 江梦天 李 林
/ ,
华中农业大学生命科学技术学院 农业微生物学国家重点实验室 武汉430070
摘要 从苏云金芽胞杆菌( )野生型菌株 基因组中通过 扩增到编码一
Bacillusthuriniensis YBT-9602 PCR
g
种具有细胞壁锚定活性的芽胞皮层水解酶的编码基因 。序列测定和编码产物结构域预测分析显示,
mbA mbA
编码产物在结构上由 个具有肽聚糖结合性能的 末端结构域和 个具细胞壁水解酶活性的 末端结构域组
1 N- 1 C-
, 。
成 具有作为细胞表面展示系统的运载蛋白的潜力 通过体外构建 mbA与绿色荧光蛋白基因gfp的融合基因
( ) , 、
mbA- 并导入苏云金芽胞杆菌受体菌中进行表达 经对重组菌全细胞免疫荧光显微镜观测 蛋白酶 pronase
gfp
, ; , , ,
消化试验和 处理 证实 被成功展示于受体菌细胞表面 经流式细胞仪测定 以细菌 葡聚糖
SDS GFP -13-14-
β
, / 。
酶为靶蛋白的表面展示系统有 42.97%的重组菌细胞可展示融合酶 重组菌具有 13.5U mL的全细胞酶活性
结果表明, 作为一种细胞壁锚定蛋白可用于构建新的苏云金芽胞杆菌细胞表面展示系统。
MbA
; ; ; ;
关键词 苏云金芽胞杆菌 表面展示系统 细胞壁锚定蛋白 芽胞皮层溶解酶 绿色荧光蛋白基因
中图分类号 文献标识码 文章编号 ( )
Q939.9 A 1000-2421201401-0007-
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