1、2基因工程基本操作程序.pptVIP

基因工程的基本操作程序;基因工程基本操作的四个步骤;一、目的基因的获取;概念：基因文库 ;基因组文库: 基因文库中包含了一种生物所有的基因，这种基因文库叫做基因组文库. 部分基因文库: 基因文库中包含了一种生物的一部分基因，这种基因文库叫做部分基因文库.;;①基因组文 库的构建;② cDNA文库的构建-----反转录法： 以目的基因转录成的信使RNA为模板，反转录成互补的单链DNA，然后在酶的作用下合成双链DNA，与载体连接后储存在一个受体菌群中，这个受体菌群就叫这种生物的cDNA文库;;;依据：目的基因的有关信息。 如：根据基因的核苷酸序列 基因的功能 基因在染色体上的位置 基因的转录产物mRNA 基因翻译产物蛋白质等特性;1、构建基因组DNA文库时，首先应分离细胞的 A、染色体DNA?? B、线粒体DNA C、总mRNA?? D、tRNA ;2、利用PCR技术扩增目的基因;（2）利用PCR技术扩增目的基因;PCR技术;：以__ ___方式扩增， 即___ _（n为扩增循环的次数）; 过程;（3） 人工合成—化学合成法;1、在遗传工程中，若有一个控制有利性状的DNA分子片段为ATGTG／TACAC，要使其数量增多，可用PCR技术进行人工复制，复制时应给予的条件是 ①双链DNA分子为模板 ②ATGTG或TACAC模板链 ③四种脱氧核苷酸 ④四种核苷酸 ⑤DNA聚合酶 ⑥热稳定DNA聚合酶⑦引物 ⑧温度变化 ⑨恒温 A．①③④⑦⑨ B．①④⑥⑦⑧ C．②⑤⑥⑦⑨ D．①③⑥⑦⑧;2、在基因工程中，把选出的目的基因（共1000个脱氧核苷酸对，其中腺嘌呤脱氧核苷酸是460个）放入DNA扩增仪中扩增4代，那么，在扩增仪中应放入胞嘧啶脱氧核苷酸的个数是 A.540个 B.8100个 C.17280个 D.7560个;1、在已知序列信息的情况下，获取目的基因的最方便方法是 A、化学合成法? ? B、基因组文库法 C、cDNA文库法?? D、聚合酶链反应;1）以下说法正确的是 （ ） A、所有的限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列 B、质粒是基因工程中唯一的运载体 C、运载体必须具备的条件之一是：具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接 D、基因控制的性状都能在后代表现出来;2）不属于质??被选为基因运载体的理由是 A、能复制 （ ） B、有多个限制酶切点 C、具有标记基因 D、它是环状DNA;3）有关基因工程的叙述中，错误的是（ ） A、DNA连接酶将黏性末端的碱基对连接起来 B、 限制性内切酶用于目的基因的获得 C、目的基因须由运载体导入受体细胞 D、 人工合成目的基因不用限制性内切酶;4）有关基因工程的叙述正确的是 （ ） A、限制酶只在获得目的基因时才用 B、重组质粒的形成在细胞内完成 C、质粒都可作为运载体 D、蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料;5）基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的。在基因操作的基本步骤中，不进行碱基互补配对的步骤是 （ ） A、人工合成目的基因 B、目的基因与运载体结合 C、将目的基因导入受体细胞 D、目的基因的检测和表达;① 概念：PCR全称为________ _______，是一项在生物__ __复制__ __ ___ ____的核酸合成技术 ;⑥过程：;哑搞棺祈横魄贺妊敛睁鹤谬阵硝网猎怠怔逛播溅幌咽耘讫亢胚哺缘温线部1、2基因工程基本操作程序1、2基因工程基本操作程序;;1、原核细胞的基因结构;1、原核细胞的基因结构; RNA聚合酶能够识别调控序列中的结合位点，并与其结合。;①不能转录为信使RNA，不能 编码蛋白质。;;真核细胞的 基因结构;;二、基因表达载体的构建 ——基因工程的核心;2、基因表达载体的组成：;启动子：位于基因的首端的一段特殊的DNA片断，它是RNA聚合酶识别和结合的部位，有了它才能驱动基因转录出mRNA，最终获得蛋白质 终止子：位于基因的尾端的一段特殊的DNA片断，能终止mRNA的转录 标记基因的作用是为了鉴别受体细胞中