055肌钙蛋白cTnI测定.docVIP

肌钙蛋白(cTnI)测定 编写者：陈慕璇 复核者：林裕龙、李雪志 编写日期：2009-11-01 实施日期：2010-01-01 每两年复审一次，条件变动后立即修订 复审/修订日期： 修订记录： 审批者：车小燕 批准日期：2009-12-01 本文件分发至：实验室1份、网络办公系统电子文档1份、档案室保存1份 概述 肌钙蛋白由肌钙蛋白I、T、C三亚基构成，和原肌球蛋白一起通过调节钙离子对横纹肌动蛋白ATP酶的活性来调节肌动蛋白和肌球蛋白相互作用。当心肌损伤后，心肌肌钙蛋白复合物释放到血液中，4-6小时后，开始在血液中升高，升高的肌钙蛋白I能在血液中保持很长时间6-10天。肌钙蛋白I具有高度心肌特异性和灵敏度，所以肌钙蛋白I已成为目前最理想的心肌梗死标志物。2．测定方法与测定原理 2.1 测定方法：化学发光技术--双抗体夹心法 测定原理： 该检测采用两种定量抗体。第一种抗体在标记试剂中，是用吖啶酯标记的纯化多克隆山羊cTnI抗体。第二种抗体在“固相”中，是与“固相”中顺磁性粒子耦合的单克隆鼠cTnI 抗体 系统自动执行以下步骤： ( 分配 100(L 样品到比色杯内。 ( 分配 100 (L标记试剂, 37℃条件孵育 2.5分钟。 ( 配制200(L固相试剂，在37℃条件孵育 5.0分钟。 ( 分离固相试剂、吸出未结合试剂，然后用试剂水洗涤比色杯。 ( 分配酸性试剂和碱性试剂各300(L，激发化学发光反应。 ( 按照系统操作指南或在线帮助系统中的说明，依据所选项目报告结果。 患者样品中cTnI和系统检测的相对光单位量（RLU）之间存在直接关系。 3． 标本采集与处理 3.1. 标本种类：静脉血，不抗凝。 3.2. 标本要求：用无抗凝管（11号条码试管），常规静脉抽血3ml，由护士采集。 3.3. 标本处理：离心分离出血清用于测定 3.4 标本储存：立即测定。 4. 仪器或器材、试剂与测定参数 4.1 仪器：ADVIA CENTAUR XP化学发光分析仪 4.2 试剂：西门子医疗诊断有限公司cTnI试剂 4.3 测定参数 5. 操作程序 5.1 试剂准备：将主试剂放入仪器主试剂仓。 5.2 试剂保存和稳定性：未开封试剂有效期至生产商规定的日期；开封后试剂可在仪器试剂仓中稳定28天。 5.3 校准：使用ADVIA CENTAUR XP校准液E进行校准。 5.4 结果计算：此过程由仪器自动完成。 5.5 质量控制： 5.5.1 质控物的准备： 5.5.2 质控物的保存和稳定性：质控物存放于-20℃可保存2周。 5.5.3 室内质控规则：±2S为警告线，±3S为失控线。 5.5.4 不精密度RCV：10% 5.6 条码标本测定：将条码标本置于标本架上，将标本架放入标本通道中，按RUN键，仪器识别后自动测定。 5.7 非条码标本测定： 5.7.1 在主界面，选择 Worklist，选择 Schedule，进入工作表编排界面。 5.7.2 在工作表编排界面，选择Schedule by SID或Schedule by Rack，输入架子号，后加A-E（根据标本在架子中的位置，如A位置则加A，B位置则加B，依次类推），按ENTER，输入标本编号，选择组合或测试项目，按SAVE保存。 5.7.3 将标本架置于标本通道，按RUN键，仪器将开始进样检测。 5.8 线性范围：0.01~50μg/L。 6. 参考值和临床意义 6.1. 参考范围：0.02～0.9μg/L。 6.2. 临床意义： cTnI升高主要用于诊断急性心肌梗塞。 7.干扰因素和注意事项 7.1. 人血清中异质性抗体能够干扰本实验结果，因此接触动物或动物血清制品的病人样本可能出现异常检测结果。 7.2. 脂血（＜11.3mmol/L甘油三酯）、黄疸(＜342μmol/L)、溶血（＜150g/L血红蛋白）时对本实验无影响。 8. 测定后标本的处理 检测后的标本在2℃～8℃冰箱保存7天以备复查，到期后由专职人员进行消毒等无害化处理 9．参考文献 ADVIA CENTAUR XP仪器说明书。 cTnI测定试剂说明书。 9.3.中华人民共和国卫生部医政司编.全国临床检验操作规程(第三版).南京：东南大学出版社,2006.10. 南方医科大学珠江医院·医学检验中心·SOP文件 文件编号：LAB－SOP－LJ055 肌钙蛋白(cTnI)测定·文件版本号：V2.0 第 1 页 共 3 页