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?99mTc-葡庚糖酸盐（GH）的制备及小鼠生物分布研究摘要：用控制变量法测定在不同实验条件（亚锡量，pH，反应时间）下的99mTc-GH溶液的放化纯度，确定最佳实验标记条件。在最佳标记条件下，将99mTc-GH作为标记物注射进小鼠体内，分别在注射后5min，30min，60min将小鼠处死，取出不同脏器及组织，称重并进行放化纯度测定。比较不同脏器及组织的放化纯度，研究99mTc-GH在小鼠体内的生物分布。关键词：99mTc-GH 最佳标记条件 放化纯度 放射元素在小鼠体内的生物分布1.实验原理及研究背景(1)放射化学实验中数据的测定是建立在对放射性同位素辐射的测量上。通过对射线的类型、能量、半衰期及其活度的测定，观察被研究对象的质和量以及它的行为和过程。实验中所研究的放射性核素不停地衰变，有很多种核素的寿命很短。因此在放射化学实验中“时间”是很重要的因素。(2)锝的配位化学及核性质:?锝是第VII族元素，其电子结构为4d55s2,能以 －1～＋7的价态存在，锝在溶液中最稳定的是TcO4-，在还原剂和配体存在条件下，锝可与配体以+1,?+3,?+5等价态形式形成稳定的配合物。?在各种还原剂中，亚锡离子是最常用的。锝直接标记法，即在配体L和SnCl2存在条件下，将99mTcO4-淋洗液加入， 生成99mTc－L配合物。葡庚糖GH可与99mTc形成[99mTcO]3+核配合物，结构如图1所示：图1. 99mTc－GH99mTc－GH可作为肾显像剂，也可以用于某些肿瘤的鉴别，此外它还可以作为标记中间体，与其它配体进行配体交换反应，生成新的[99mTcO]3+配合物。99mTc的半衰期为6.02小时，发射能量约为140KeV的γ射线，其优良的核性质非常适宜人体显像，目前99mTc制备的放射性药物约占临床诊断药物的80％以上。(3)放射化学纯度的测定：?放射化学纯度(简称：放化纯度)，指在一种放射性核素产品中，以某种特定化学形态存在的这种放射性核素的百分含量。放射化学纯度常用的测定法是色谱法，如：HPLC、TLC、纸色谱法等，其中纸色谱法和薄层色谱法为最常用。层析装置和层析条如图2，图3所示：图2.纸色谱装置示意图 图3. 纸色谱示意图展开后的层析条通过将层析条均分为10等分，通过γ井型探测器（定标器）分别测定各段层析的放射性计数Ii和本底计数Ib，判断Rf值，计算放射化学纯度。(4)影响99mTc-GH的标记产率和放射化学纯度的主要影响因素有：亚锡含量，pH，温度和反应时间。用控制变量法确定最佳标记条件。(5)小鼠生物分布研究?:实验所用小白鼠为昆明种，该品系为封闭种群。??实验时小鼠分3组，每组3只。在最佳标记条件下，采取尾静脉注射，注射后分别过5min，30min，60min后断头处死，取各个脏器及组织称重再进行放化纯度测定。?研究小鼠体内放射性元素的生物分布。2．仪器与试剂?2．1主要仪器与材料：放射性活度计(中国计量技术开发总公司RM905a),自动定标器(国营二六一厂),井型γ闪射探头(北京核仪器厂FT-603)，注射器，鼠笼，小鼠注射用鼠筒，解剖工具，青霉素小瓶，记号笔，精密pH实质，毛细管，试管，聚酰胺薄层层析膜，小白鼠（雌性）。?2．主要试剂：葡庚糖酸钠，氯化亚锡，盐酸，氢氧化钠，生理盐水，乙腈。?3.实验部分3.1实验目的：(1)掌握锝-99m配合物直接标记法最佳标记条件的研究方法；(2)熟悉放射性操作的测量方法和安全操作规程；?(3)掌握放射性活度的测量方法和定标器的使用；(4)掌握放射化学纯度的层析测定方法；?(5)练习并掌握小鼠生物分布实验技术。3.2实验步骤3.2.1层析体系的准备（1）生理盐水/聚酰氨?（2）乙腈/聚酰氨?测定上述两个体系下99mTcO4-、99mTcO2.xH2O和99mTc－GH的Rf值，以确定99mTc－GH的生成，并计算其放化纯度。实验时将每个层析条分成10等份，通过井型探测器（定标器）分别测定各段层析的放射性计数Ii和本底计数Ib，判断Rf值，计算放射化学纯度。3.2.2?试液的配制?（1）HCl溶液：1mol/L,0.1mol/L??各50ml??（用途：调pH值，稀释Sn(II)）（2）NaOH溶液：1mol/L,0.1mol/L??各50ml??（用途：调pH值）?（3）GH溶液的配制：准确称量GH?100mg，放入干净的青霉素小瓶中，用移液管量取1.0ml蒸馏水溶解。（浓度为10mg/0.1ml）?（4）SnCl2溶液的配制：干净的青霉素小瓶中，用移液管量取浓HCl?0.2ml，迅速称量氯化亚锡20-50mg置于小瓶中，待亚锡完全溶解（可水浴加热,加快溶解）后，依亚锡量，用0.1?mol/L?HCl将其稀释