中药对冠心病血浆内皮素影响实验探究.doc

中药对冠心病血浆内皮素影响实验探究摘 要 目的：观察中药通冠颗粒对急性心肌缺血兔血浆内皮素(ET)的影响。方法：5组健康家兔分别给予生理盐水、小剂量通冠颗粒、大剂量通冠颗粒、合心爽片，通过结扎麻醉兔的冠状动脉左前降支中段，造成急性心肌缺血模型；另一组给予生理盐水，不结扎。于不同时相同步采血测量其ET水平变化。结果：结扎前通冠颗粒组和合心爽片组家兔的ET水平均低于空白组，在结扎后的各时相，结扎组、通冠颗粒两组、合心爽片组ET升高程度小于空白组。结论：家兔心肌缺血时存在血管内皮功能失调，此时ET增多，而通冠颗粒能通过调整ET释放而保护血管内皮细胞，改善心肌缺血，从而达到防治冠心病的作用。 关键词 通冠颗粒 心肌缺血 内皮功能 血管内皮细胞产生的内皮素(ET)是已知作用最强和效应最持久的内源性血管活性肽，低剂量时引起血管舒张，高剂量时引起显著且持续的血管收缩。ET还可以引起平滑肌细胞增殖。目前已发现内皮素与冠心病(CHD)、高血压、动脉粥样硬化、充血性心力衰竭、心肌肥厚、冠脉成形术后再狭窄等疾病相关。 资料与方法 实验试剂：ET试剂盒由解放军总医院东亚免疫技术研究所提供。 实验仪器：6511 型心电图记录仪，日本光电公司；SANYO MDF-382E超低温冰箱，日本三洋公司生产；Heraens Bifugezsrs 型低温离心机，德国海尔公司生产；SN-695B型智能放免γ测量仪，上海原子核研究所日环仪器一厂生产。 中药通冠颗粒组成及煎制方法：红参15g，黄芪25g，当归15g，红花10g，丹参20g，血藤20g，川芎20g，元胡15g，郁金15g，桃仁15g，栝蒌15g，枣仁20g，远志15g，白芍15g。由江阴天江药业有限公司提供，用喷雾干燥法制成清颗粒剂，开水冲服。 西药：合心爽片由天津田边制药厂提供。批号：0212099。 实验动物及分组：健康新西兰大耳白兔，雌雄不拘，共40只，体重2.5±0.2kg，为二级动物，由我院实验动物中心提供。随机分为5组：①空白对照组；②模型心肌缺血组；③通冠颗粒低剂量组；④通冠颗粒高剂量组；⑤阳性对照组。 动物造模：参照文献[1]方法进行。取家兔称重，用乌拉坦3.3mg/kg腹腔麻醉后固定于手术台，将针状电极插入四肢皮下，并调节心电图灵敏度至1mV=15mm，纸速为50mm/秒，记录结扎前5分钟Ⅱ导联心电图，然后剪毛、消毒、铺巾，无菌操作，在胸骨左缘旁纵行切开第3～5肋骨，暴露跳动的心脏，剪开心包膜，于冠状动脉左前降支中段旁进针，丝线穿过心肌表层，在对侧出针，将直径2mm的塑料管置于结扎线与血管之间，拉紧结扎线，使塑料管压迫血管引起冠脉闭塞(正常对照组不结扎)，检查无出血，逐层关闭胸腔，造成急性心肌缺血，记录结扎后心电图。并于结扎前15分钟、结扎后30分钟抽取血液，检测内皮素水平，采用放射免疫法，具体操作按说明书进行。 给药方法：①空白对照组，用生理盐水3ml/kg；②模型心肌缺血组，用生理盐水3ml/kg，结扎不灌药；③通冠颗粒低剂量组，相当于生药量8.21g/kg；④通冠颗粒高剂量组，相当于生药量16.42g/kg；⑤西药组：合心爽2.82mg/kg。上述药物在试验前用生理盐水制成等体积(3ml/kg)混悬液备用，然后对动物进行灌胃给药，中药组、西药组连续给药6天，末次给药后1小时对动物进行造模，复制急性心肌缺血模型。 观测指标：血浆ET的测定：放射免疫法，具体操作如下：取静脉血2ml，注入含10%EDTA二钠3μl 和抑肽酶40μl的试管中，混匀，4℃，3000次/分离心10分钟，分离血浆，测定前，使样本置于室温或冰水中复融，再次4℃，3000次/分，离心5分钟，取上清测定。 数据处理：结果用X±S表示，显著性比较采用SPSS统计软件包行t检验。 结果与分析 心电图：冠脉结扎前描记到正常心电图，ST段位于等电位线，结扎冠状动脉后可见ST段弓背上抬，T波逐渐高耸，整个缺血期缺血性ST-T变化非常明显，表明家兔急性心肌缺血模型造成。 ET数据统计：见表1。 结扎后：模型心肌缺血组血浆ET值明显高于空白对照组，与空白对照组比较P0.05。西药组与低剂量中药组之间差异有显著性，P0.05。 实验结果表明：缺血心肌存在内皮功能失调(ET水平升高)的病理现象，中药通冠颗粒能明显拮抗急性心肌缺血家兔血浆ET水平。高剂量通冠颗粒作用更强，其作用与西药合心爽片的作用相当，并明显强于低剂量通冠颗粒组。 讨 论 已有研究发现冠脉急性缺血的发作，与冠脉狭窄相关性差，而与内皮功能障碍关系密切[2]。通过本实验可以看出，结扎冠脉后血浆ET明显增高，与空白对照组有显著性差异(P0.05)。说明通冠颗粒能通