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中药指纹图谱探究中面临问题及思索
中药指纹图谱探究中面临问题及思索摘要:根据建立中药指纹图谱的要求及发展现状,分析目前存在的问题,并提出改进方向。
关键词:中药;指纹图谱
中图分类号:R282
文献标识码:A
文章编号:1672-979X(2010)03-0117-04
中药现代化是中医药理论现代化的重要组成部分,而质量标准现代化是中药现代化的关键之一。中药为多成分体系,药效是众多单一活性化学成分的综合作用,体现中医药理论“整体观念”和“辨证施治”之精髓。因此,利用中药指纹图谱质量评价体系分析中药(复方)成分的整体特性是目前关注的热点。但目前中药指纹图谱研究中还有一些模糊认识,现就其中的一些问题提出几点看法及建议。
1 建立中药指纹图谱的要求
中药指纹图谱要求具备实用性,应满足特征性、重现性和可操作性3大要求。不论是中药材、中成药、中药方剂,其指纹图谱一定要能体现其特征,亦即专属性或唯一性;指纹图谱主要用以表现、控制中药化学成分群的整体,故同一样品,同一操作条件下应有较好的重现性。因此要选用适宜的分析方法建立指纹图谱。采用何种数学方法分析变化中的稳定性是重点解决的问题;指纹图谱的可操作性即针对不同用途,选用不同分析方法达到不同的要求。
2 中药指纹图谱面临的主要问题
2.1 指纹图谱应用的前提
国外有关指纹图谱的报道无一例外地将指纹图谱作为鉴别项,评价植物药的真实性及产品质量的一致性。建立标准指纹图谱时,所选药材的基源鉴定是基础,必须准确。因此建立标准指纹图谱离不开传统生药学鉴定。此外,指纹图谱揭示的各种成分须和中医理论相结合,以药效、毒理等作为基础。大量的临床验证和药效实验证明,单个组分与整味药的作用是绝对不等同的。因而指纹图谱与药效、工艺研究相结合,用于评价疗效,完整地控制了中药的物质群体。然而,指纹图谱与药理作用之间的相关性仍然模糊,人们无法从指纹图谱中解析某一峰或者某一段峰所代表的药理作用。由于中药成分复杂,有效成分尚不完全清楚,目前指纹图谱反映的基本上是化学信息,而不是药效信息。指纹图谱与药效脱节,成为指纹图谱最有争议的问题,即指纹图谱的理化变化是否必然引起药理作用的变化。
2.2 色谱法本身的缺陷性
中药指纹图谱一般以HPLC指纹图谱为最基本的方案。联用技术是目前最受重视的手段。色谱图中色谱峰定位受许多因素的影响,一般均用色谱峰保留值定位。虽然色谱实验条件是控制保留值的主要因素,但尚有许多非色谱技术所致的因素。中国药典附录中规定了高效液相色谱法的仪器要求,除固定相种类、流动相组分、检测器类型不得任意改变外,色谱柱内径、长度、固定相牌号、载体粒度、流动相流速、混合流动相各组分比例、柱温、进样量、检测器灵敏度等均可适当改变,以适应具体品种并达到系统适应性试验的要求。即只要满足待测成分含量测定的要求即可,其他成分是否分开或滞留在色谱柱中无关紧要。作为中药及其制剂的色谱指纹图,这样变动可能在生产过程检测、新药审批、药检系统检验、市场质量监督的实际执行中带来难以预料的后果,因为色谱条件的任何改变,都意味着整体色谱图形变异,给鉴别工作造成困难。
2.3 中药材本身质量的控制
由于植物药的次生代谢产物随外界环境变化而改变,所以,其化学指纹图谱就具有无法精密度量的模糊性。相同品种的中药样品间的个体差异会在其内在特性上有所反映,这些差异必然导致色谱图的差异,因而指纹图谱强调的是色谱的完整面貌而不是精确的细微差别,反映的质量信息是综合的结果。表现在化学指纹图谱上不是对单一化学成分定性、定量,而是展现某一类成分的整体谱图特征。在众多潜在不稳定因素存在的情况下测得稳定的指纹图谱,也是需要解决的首要难题。以色谱图分析直接作为鉴别依据的模式识别方法中,借助现代电脑技术比较各图谱,据此说明各图谱之间的相似性和差异性。虽然图谱具有简单且直观的优点,但无法面对因各样品的个体差异所致的不同。因此,不仅要抓住、突出品种的特征,而且要模糊个体特征,以获得客观公正的鉴定。
2.4 指纹图谱与化学成分的相关性
中药指纹图谱质量控制法的局限性还表现在指纹图谱与化学成分之间缺乏相关性,这主要是指纹图谱中色谱峰纯度不够所致。单味药材的化学成分十分复杂,复方中成药化学成分之间的交叉和相互影响更增加了分析结果的不确定性。当色谱峰纯度受到质疑时,特征组分峰与化学成分的对应关系是不确定的;不同的指纹图谱可以表示样品之间的差别,但是,相同的指纹图谱并不一定代表彼此具有相同的化学组分,样品指纹图谱与标准指纹图谱相符并不一定表示样品与标准相符。因此,经过指纹图谱比对后得出的相符结论是不可靠的。
2.5 指纹图谱与实验条件的一致性
中药指纹图谱质量控制方法是以标准指纹图谱为比对标准,可因此省去对照品和对照试
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