分子遗传学技术在针灸学中应用.doc

分子遗传学技术在针灸学中应用摘要：目的：探讨分子遗传学技术在针灸学运用的状况。方法：对近10年(1994―2006年)分子遗传学技术在针灸学运用的文献进行概括、分析。结果：分子遗传学技术已在针灸学中得到越来越多的应用，并且针灸治疗作用机理的研究也取得了一定的成绩；目前研究所选用的对象仍然以实验动物为主，少见人体试验。结论：分子遗传学技术很可能有利于针灸学各种重要问题的阐明，而针灸学也很可能在人类基因组功能测试及基因转移方面发挥重要的作用。 关键词：分子遗传学；针灸学；技术应用；基因 中图分类号：R245-0　文献标识码：A　文章编号：1673―7717(2007)1l―2273―04 分子遗传学是在生命信息大分子的结构、功能及相互关系的基础上来研究遗传与变异的科学。它着重研究遗传信息大分子在生命系统中的储存、复制、表达及调控过程。医学分子遗传学的研究方法采用一系列分子生物学实验技术，以DNA水平上的基因分析为主、同时包括RNA、蛋白质、染色体及细胞水平上的研究分析。分子遗传学研究的方法，特别是重组DNA技术一基因工程，已经成为许多遗传学分支学科的重要研究方法。而针灸学作为传统中医药学中与当代科学技术结合得较紧密的一门科学，已经开始运用分子遗传学技术研究针灸学的问题，并且取得了一定成就。从而显示了分子遗传学在针灸学中的运用具有较广阔的前景。 1 分子遗传学技术在针灸学中运用的概况 随着分子遗传学技术在较多学科和领域中的应用与其自身技术的不断发展和完善，其在针灸学中运用也越来越多，特别是在2000年以后，每年发表的相关论文几乎都在5篇以上。近10年(1994―2006年)分子遗传学技术在针灸学中运用概况如下。 1.1　实验研究 所采用的方法有免疫组化、PCR、原位杂交、点杂交、Northern Blot、Southem Blot、基因芯片技术等技术。研究中所选对象仍以实验动物为主。现已对针灸治疗脑梗塞、溃疡性结肠炎、急性心肌缺血、绝经后骨质疏松症、脊髓损伤、肥胖等疾症机理，以及经穴脏腑相关性、抗衰老、镇痛、电针耐受性、针感信息传递、抗吗啡戒断症状和抑制多药抗药性的机理进行了研究。其中对脑梗塞、溃疡性结肠炎、经穴脏腑相关性、抗衰老、镇痛的机理研究较多。 ①针灸治疗中风。王利等以原位杂交技术及苏木素一伊红染色方法观察：电针对大鼠脑局部缺血后受损神经元的保护作用可能与增强了c-fos mRNA的表达有关。邹军等发现：电针治疗大鼠缺血性中风的早期作用机制可能通过了抑制c-fbs蛋白的表达进而调控其后发的凋亡相关基因。孙忠人等采用免疫组织化学法和原位分子杂交技术发现：针刺预处理和脑缺血预处理均可能通过上调c－fos mRNA表达而减轻严重缺血后细胞凋亡。马岩瑶等采用分子杂交技术发现：醒脑开窍针刺法可增加大鼠梗塞区皮质、纹状体、海马HSP70基因表达。陈泽斌等采用基因芯片技术发现：一些针刺诱导的基因表达产物在针刺预处理抗脑缺血再灌注损伤过程中发挥了重要作用。针刺调节脑缺血后细胞凋亡的分子机制也引起了重视。余晓慧采用Faa蛋白免疫组化检测法发现：电针可降低Fas蛋白表达。邹军等应用Tunel法发现：电针抑制大鼠神经元凋亡的发生可能通过升高bel―2表达途径，可能不是通过抑制P53基因蛋白高表达实现的。此外，傅立新等采用组织原位杂交技术发现：针刺可阻断实验性脑出血大鼠的ET基因表达。 ②隔药灸治疗大鼠溃疡性结肠炎。吴焕淦等采用RT―PCR法发现：隔药灸防治溃疡性结肠炎肠纤维化可能与调节大鼠溃疡性结肠炎肠纤维化结肠TGF-β1及其受体TGF―pR、TGF―BRmRNA表达，减少炎症组织TGF―β1。的产生，并抑制其受体信号转导有关。吴焕淦等采用荧光定量PCR法发现：隔药灸可调节IL－1β、IGF―1基因表达。吴焕淦等采用BiostarR―40s基因芯片及实时荧光定量PCR方法发现：大鼠溃疡性结肠炎的发生涉及多种基因表达异常，隔药灸可调节IL―1β等诸多基因的表达。此外，吴焕淦等在实验中还发现针灸可以抑制模型大鼠脾脏、结肠黏膜iNOS、IL一1β基因表达，降低NO、IL―1β在组织中的浓度及组织细胞对炎症的反应性。 ③经穴脏腑相关性。张进等采用抗FOS蛋白的免疫组织化学方法发现：电针内关穴可引起大鼠延髓内神经元的广泛c―fos表达。张泓等采用RT―PCR方法得出：CCKA―R―mRNA表达增强是电针足阳明经穴对胃运动功能产生兴奋作用的内在机制之一，针刺足阳明经对胃运动的影响，不仅与相关的脑肠肽的释放有关，还与其相应受体基因表达的强弱有关；足阳明经与胃相关具有相对特异性。易受乡等采用放射免疫及PC―PCR法得出：针刺足三阳经以胃经组对家兔胃黏膜损伤保护作用最强，其机制可能与调整有关脑肠肽及生长