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即时痰、夜间痰及晨痰分枝杆菌检查研究[关键词] 结核分支杆菌； 检出结果； 分析 [中图分类号] R825.2 [文献标识码] A[文章编号] 1005-0515（2011）-11-352-01 结核病控制项目把痰细菌学检查，即厚涂片法摆列首要位置，被形象的比喻为项目工作的“方向盘”。结核病实验室检查是发现传染源的最主要手段，有效的细菌检查是确诊结核病、选择治疗方案、考核疗效、指导整个化疗过程的主要依据[1]。现将2010年1-12月门诊可疑和肺部有异常阴影345份痰检结果分析如下。 1 材料和方法 1)留痰容器使用统一的直径4?、高度2?带盖塑料盒。2)受检人员根据项目“规划”查痰3份，即深咳的即时痰1份，夜间痰和晨痰各1份，并按质控要求，不合格重新送痰。一张载玻片上只能涂抹一份痰标本；每张载玻片只能用一次，不得清洗后再次使用；应使用95%乙醇擦拭(或浸泡)脱脂，经干燥、清洁、无油污、无划痕的新载玻片制备涂片，在玻片一端的1/3处注明实验室序号。3)制备涂片；小心打开承载痰标本的容器，防止产生气溶胶或使标本外溢；仔细观察标本，使用折断竹签茬端，挑取痰标本中干酪样脓样或可疑部分约0.05-0.1ML，于玻片正面右侧2/3处，均匀涂抹成10?×20?卵圆形痰膜。涂抹完毕后的痰标本，在结果报告前应暂时保留；为保证检验人员的安全，严禁在涂抹标本的同时，对载玻片进行加热。4)涂片自然干燥后，放置在染色架上，玻片间距保持10?以上；火焰固定(在5秒钟内将玻片置于火焰上烤4次)。5)滴加石碳酸复红染液盖玻片，火焰加热至出现蒸汽后脱离火焰，保持染色5分钟。染色期间始终保持痰膜被染色液覆盖，必要时可持续加染液。加温时不要使染液沸腾。6)流水自玻片一端轻缓冲洗，冲去染液，沥去标本上剩余的水自痰膜上端外缘滴加脱色剂布满痰膜，脱色1分钟，如有必要，需流水洗去脱色液后，再次脱色至痰膜可视红色为止。流水自玻片一端轻缓冲洗，冲去染液，沥去标本上剩余的水。7)滴加亚甲蓝染液，染色30秒钟。8)流水自玻片一端轻缓冲洗，冲去复染液，然后沥去标本上剩余的水，待玻片干燥后镜检。9)染色合格的玻片，由于被亚甲蓝染色而呈亮蓝色。将染色后的玻片放置在报纸上，若透过痰膜不能分辨报纸上的文字，则表明该玻片涂抹过厚。 2 判断标准 1)阴性:镜检100个视野以上或连续观察5分钟未发现抗酸杆菌。2)阳性:(1＋)100个视野内有3-9条抗酸杆菌。(2＋)10个视野内有1-9条抗酸杆菌。(3＋)每个视野内有1-9条抗酸杆菌。(4＋)每个视野内有9条以上抗酸杆菌。受检人数345例，共1035份痰标本，3份痰标本阳性或其中2份，1份阳性者130例，涂阳检出率37.68%，其中即时痰116例(87.23%)，夜间痰检出126例(96.92%)，晨痰检出119例(91.54%)。 3 结果 3份痰均为阴性215例，占受检人数的61.31%，即时痰、夜痰、晨痰检查结果见表1、2。 表1三种痰标本检出痰菌量 表2即时痰、夜间痰、晨痰菌量比较 4讨论分析 1)夜间痰和清晨浓缩痰检出率较高，夜间痰检出率高于晨痰5.38%，高于即时痰9.69%，晨痰高于即时痰4.31%。三种痰标本菌量比较没有显著的差异变化。2)结核分枝杆菌俗称结核杆菌，是引起结核病的病原菌。可侵犯全身各器官，但以肺结核为多见。结核病至今仍为重要的传染病。估计世界人口中1/3感染结核分枝杆菌。据WHO报到，每年约有800万新病例发生，至少有300万人死于该病。根据2000年全国流行病学抽样调查，全国近5.5亿人口感染了结核病，明显高出全球1/3人口感染水平。我国现有肺结核病人450万，其中传染性肺结核病人150万，每年新发肺结核病人145万，每年因肺结核病死亡13万。在因结核病死亡的病人中，有21.6%的病人由于经济等原因从没有接受过结核病的治疗，83.8%的病人从未进行过登记报告，全国大约80%的结核病人在农村，结核病是我国因病致贫、因病返贫的主要疾病之一。在结核病防治工作中，结核病的细菌学检查占有重要的地位，痰检查结核分枝杆菌工作是发现传染源的主要手段，并有临床鉴别诊断及疗效考核的重要意义。过去临床诊断以X线检查为主，现在世界卫生组织专家委员会提出只有发现结核分枝杆菌的患者，才算1例结核病，无菌患者只是可疑病例，所以找到结核分枝杆菌方为诊断结核病的主要依据。要找到结核分枝杆菌，第一要素是痰标本的质量，是提高阳性率的关键。不合格痰的阳性率为1.25%，培养为2.5%。阳性率极低，极易造成排菌患者的漏诊。因此，取得真正合格的痰液，才能真正做到痰检标准化。在显微镜下每个视野中看到一条结核分枝杆菌，则每毫升痰中含有50万条。培养标本只要有100条即可培养出。3)肺结核病人痰内结核菌的检出