寒感颗粒治疗急性上呼吸道感染药效探究.docVIP

寒感颗粒治疗急性上呼吸道感染药效探究摘要 目的:探讨寒感颗粒体外抑菌、抗炎、解热作用。方法:进行体外抑菌实验,观察其抑菌作用;采用小鼠腹腔毛细血管通透性法观察其抗炎作用;采用内毒素致热观察其解热作用。结果:寒感颗粒对金黄色葡菌球菌、鲍曼不动杆菌均有抑制作用,对大肠杆菌和铜绿假单胞菌无作用。寒感颗粒能抑制醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性的增加。降低内毒素致家兔发热模型的体温。结论:寒感颗粒具有抑菌、抗炎、解热作用。 关键词 寒感颗粒 急性上呼吸道感染 抑菌实验 抗炎实验 寒感颗粒来自施长春主任医师经验方,由我院药剂科和浙江省中医药研究院联合研制的纯中药医院制剂,由荆芥、防风、淡豆豉、薄荷、苍耳子、甘草等药物组成,具有辛温解表、宣肺散邪的功效。近年来,在我院用于治疗急性上呼吸道感染,疗效满意。我们既往试验中显示寒感颗粒对细胞无毒性作用,对流感病毒甲1型、甲3型有一定灭活作用。为进一步探讨其治疗机理,现着重进行了体外抑菌、抗炎、解热实验,为其临床治疗急性上呼吸道感染提供实验依据。现报道如下。 1 实验材料 1.1 主要实验药物:寒感颗粒浸膏(金华市人民医院提供批号。醋酸泼尼松片(浙江仙居制药股份有限公司,批号:070904);盐酸左氧氟沙星(浙江省医药股份有限公司新昌制药厂,批号:070220);大肠杆菌内毒素(上海申索试剂有限公司);MH培养基。 1.2 实验菌株:金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌等4种致病菌共100株,其中质控菌株金黄色葡萄球菌ATCC25923株和大肠杆菌ATCC25922株由浙江大学微生物教研室提供。 1.3 实验动物:健康昆明种小鼠,雌雄各半,体重18g±2g,周龄6~8周,清洁级;健康SD雄性大鼠,雌雄各半,体重120~150g,清洁级;健康家兔,雌雄各半,体重约2kg,由浙江省中医药研究院实验动物中心提供。 1.4 主要仪器设备:①毛细管放大测量装置(自制);②BS210S天平;③80-1离心机;④712分光光度计;⑤电子温度计。 2 实验方法与结果 2.1 寒感颗粒体外抑菌实验:采用MH培养基培养细菌。所有培养基经配制和灭菌后置于37℃培养24h检菌,无菌生长者方能使用。接种细菌后于37℃培养18~24h。细菌质控菌株金黄色葡萄球菌ATCC25923株和大肠杆菌ATCC25922株对盐酸左氧氟沙星的MIC100分别为1μg/ml和2μg/ml,均在NCCLS规定的范围内。采用试管倍比稀释法,使寒感颗粒浸膏在试管中的终浓度分别为40、20、10、5、2.5、1.25、0.625、0.312mg/ml。加入菌株均配制成2×106cfu/ml的细菌悬液,使细菌终浓度为1×105cfu/ml。于37℃培养24h后观察结果,以细菌菌株未生长的药物最高稀释度为其MIC值。实验中以接种等量细菌的PBS作为阴性对照组。结果见表1。 由表1测定结果表明,寒感颗粒浸膏对金黄葡萄球菌和鲍曼不动菌的MIC均为5mg/ml;对大肠杆菌和铜绿假单胞菌无作用。 2.2 寒感颗粒对小鼠毛细血管通透性的影响: 健康昆明种小鼠,体重18~22g,雌雄各半,共40只,将小鼠随机分为寒感浸膏高、中、低剂量组,阳性药对照组(醋酸泼尼松)及空白对照组(生理盐水组)各10只。寒感浸膏组(高、中、低),分别灌服试验药物20g/kg、10g/kg、2g/kg体重。阳性药对照组,剂量为0.05g/kg。空白组灌服蒸馏水0.4ml/20g体重。 每日灌胃给药1次,连续5天,于末次给药后半小时各组小鼠尾静脉注射0.5%伊文思蓝生理盐水溶液0.1ml/10g,并立即每只腹腔注射0.6%乙酸0.2ml/只,半小时后脱颈椎处死小鼠,剪开腹部,用生理盐水每次2ml清洗腹腔3次,吸取腹腔冲洗液后合并至试管中,以3000r/min,离心10min,取上清液于590nm处比色。数据进行统计学处理。结果见表2。 由表2结果显示,寒感颗粒浸膏高剂量组与阳性对照组显示对醋酸引起的毛细血管通透性增加有一定的抑制作用。 2.3 寒感颗粒家兔解热实验:取健康家兔,每天测体温(肛温)1次,连续3天,使兔子适应测温操作,选择体温在38.0℃~39.6℃,且体温波动在0.2℃以下的兔子作为合格兔。取合格兔40只,间隔30min连续测体温2次,以每兔平均体温作为该兔基础体温,按基础体温分层随机分为4组,每组10只,雌雄各半。分别为寒感颗粒高、低剂量组,阳性药物对照组(阿司匹林组)和空白对照组。各组兔子按寒感颗粒高、低剂量组18.70g/kg、4.68g/kg;阿司匹林阳性对照组给药100mg/kg;空白对照组给等量的生理盐水灌胃一次。0.5h后按照内毒素致热法复制