干细胞移植治疗慢性下肢缺血疾病临床探究进展.docVIP

干细胞移植治疗慢性下肢缺血疾病临床探究进展【关键词】 干细胞移植；慢性下肢缺血；治疗；临床研究 doi：10.3969/j.issn.1004-7484(x).2012.06.582 文章编号：1004-7484（2012）-06-1699-02 慢性下肢缺血性疾病包括下肢动脉硬化闭塞症、血栓闭塞性脉管炎等。传统的治疗方法主要是采用血管旁路移植术、经皮肤内血管成形术及药物治疗。然而对于下肢动脉流出道差，无动脉转流术适应证者，或体质差无法耐受搭桥手术者治疗办法则较少，内科保守治疗效果欠佳，最终难以避免高平面截肢。近年来，干细胞移植在多学科领域得以广泛应用，尤其是在下肢缺血的临床运用越来越深入［1］。干细胞移植技术能够促使动脉缺血性肢体侧枝循环的建立，从而改善症状，降低截肢率或截肢段面，为此类疾病的患者带来希望。1 基础与临床研究 1.1 基础研究 ①提供细胞材料与成血管细胞因子：目前已经证实，体外细胞培养时多种骨髓源性干细胞可被诱导分化为内皮细胞或平滑肌细胞，细胞标记物显示植入体内的骨髓源性干细胞结合进缺血组织侧支动脉和毛细血管管壁内［2］。这些结果提示干细胞可能作为细胞材料参与血管壁的组成。②促进血管生成与动脉生成：前者是指通过血管内皮细胞迁移、增殖，在原有的血管上以出芽的方式生长出新的血管；后者是指在原来没有血管系统的情况下，通过血管内皮祖细胞(EPC)和造血干细胞产生血流的新通道［3］。 1.2 临床研究 2002年Tateishi Yuyama等［4］首次报道了干细胞移植治疗下肢缺血性疾病。2003年起谷涌泉等［5］首次报道了自体骨髓单个核细胞移植治疗糖尿病足。虽然国内外研究报道的结果稍有差异，但多数报道临床效果较好，且目前暂未发现相关手术并发症，说明干细胞移植治疗肢体慢性缺血性疾病安全、有效。2 适应证与禁忌症 国内干细胞移植技术应用于肢体缺血性疾病尚处于起步阶段，其适应症及禁忌症需经大病例、多中心的临床研究进一步证实，根据目前报道，总结如下。 2.1 适应证 经药物治疗效果不佳和近端血供较好、远端动脉闭塞严重、无介入或动脉重建等手术适应证的肢体慢性缺血病人；肢端严重缺血、自身条件不能耐受动脉重建手术的病人；严重间歇性跛行影响生活质量且静息状态下踝肱比(ABI)1×109个时，多数病例有临床效果；④内皮祖细胞的数量与质量［9］：目前认为内皮祖细胞(EPC)是血管新生的主要物质基础，集落刺激因子、趋化因子、促血管生长因子、他汀类药物、雌激素等可促进EPC动员［10］，有效的EPC的动员有利于促进血管新生。 3.2 手术方法 目前研究证实不同来源的自体干细胞治疗下肢缺血疗效无明显差异。一般青壮年病人，骨髓造血功能较好，可选择自体骨髓血干细胞，老年病人则可选择自体外周血干细胞。但是对于伴有严重心脑血管疾病的患者，采用外周血干细胞移植需特别慎重［10］。①骨髓动员：应用重组人粒细胞集落刺激因子(G-CSF)150μg肌肉注射，每天2次×3d-5d，每天抽血检测血常规了解白细胞计数，术晨化验WBC(2-5)×109/L。②自体骨髓血干细胞移植术：局麻下经髂后上嵴穿刺抽取骨髓血200-300ml，采用人淋巴细胞分离液经密度梯度离心法提取出单个核细胞，再用生理盐水稀释成50-60ml悬液备用。在腰麻或硬膜外麻醉下，对患侧肢体缺血处进行肌肉注射的方法。将分离出的自体骨髓干细胞悬液沿下肢动脉走行路径，进行多点注射。每针间隔2-3cm，每次注射1.0ml(深度约1.0-1.5cm)。患肢股动脉未闭塞者加用干细胞液5-10ml行股动脉内注射。③外周血干细胞移植术：应用血细胞分离机采集干细胞，其处理血量按自身循环血量的2-2.5倍，约8000-10000ml，全血：枸橼酸钠抗凝剂(ACD)=10-11∶1，全血流速39-50ml/min。将分离出的外周血干细胞浓缩成“干细胞液”50-60ml［11］。按上述方法进行缺血部位肌肉注射。4 疗效评价 国内目前尚未建立完整的客观指标评价体系，多采用首都医科大学宣武医院主观及客观疗效评价分级指标［8］。主观标准：患肢疼痛；患肢冷感；患肢麻木。客观标准：间歇性跛行距离；踝肱指数(ABI)测定；经皮氧分压(TcPO2)测定；新生侧支血管评估；保肢率评价；足部创面的变化。目前新的客观评价方法有双下肢放射性核素扫描，与下肢动脉造影及下肢动脉CTA比相较，具有费用低、创伤小、并发症少等优点［12］。5 现阶段存在问题 干细胞移植是一种治疗肢体慢性缺血性疾病的新方法，临床经验不足，很多问题需进一步研究解决，最突出的是以下几点：①干细胞具有多种分化方向，如何诱导其向血管内皮细胞定向分化。②对于具有潜在的骨髓增生异常倾向的病人，G-CSF有诱发血液病的可能性，其安全性尚需要进一步研