东北雅罗鱼微卫星分子标记的筛选及特征分析-华北农学报.PDF

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东北雅罗鱼微卫星分子标记的筛选及特征分析-华北农学报

华北农学报 ·2 0 1 1 ,2 6 (1 ):8 7 -9 3 东北雅罗鱼微卫星分子标记的筛选及特征分析 1 ,2 1 1 ,2 1 ,2 1 3 3 3 , , , , , , , 刘金亮 常玉梅 徐丽华 刘春雷 梁利群 韩国苍 高玉奎 柳玉海 (1. , 150070 ;2 . , 20 1306 ; 中国水产科学院黑龙江水产研究所 黑龙江哈尔滨 上海海洋大学水产与生命学院 上海 3 . , 024000) 赤峰市克什克腾旗达里诺日渔场 内蒙古赤峰 : 。 Sau 3AI 摘要 通过磁珠富集法筛选东北雅罗鱼的微卫星分子标记 采用限制性内切酶 对东北雅罗鱼基因组 DNA , 400 ~ 900 bp PCR , (CAG)、(TGA)、(AGAT)、 进行酶切 选取 的片段进行 全基因组扩增 并利用生物素标记的 8 8 6 (GATT)4 。 T DH5 , SaulA 6 个探针进行微卫星片段的富集 将得到的片段与 载体连接后转入 α 大肠杆菌中 然后以 为 PCR , 。 :1 4 16 引物对长出的菌落进行 扩增 挑取扩增后片段大小符合条件的菌落送生物公司测序 结果表明 个阳性克 1 047 5 , 67 . 99% , 15 . 31% ; 隆中有 个克隆含有重复次数大于 次的微卫星序列 完美型占 非完美型为 混合性标记占 16. 70% 。 160 105 , ,56 , 23 从中选出 个微卫星序列设计 对引物并合成 经过筛选 对引物可扩增出清晰条带 其中 对具 。 18 , 3 ~ 11, 有多态性 选取 对

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