正交设计法对二妙胶囊醇提取工艺探究.docVIP

正交设计法对二妙胶囊醇提取工艺探究摘要：目的：优选二妙胶囊中黄柏最佳提取工艺。方法：采用正交设计L9(34)法，以总浸膏量和盐酸小檗碱的含量为指标，综合评分考察。结果：最佳提取工艺为10倍量的70％乙醇回流提取3次，每次1.5h。结论：优选得到的工艺合理可行。 关键词：二妙胶囊；盐酸小檗碱；正交实验 中图分类号：R284.1　文献标识码：A　文章编号：1673-7717(2009)05-1087-02 二妙丸由苍术、黄柏两味药组成，为主治湿热流注之筋骨疼痛或两足痿软或足膝红肿、下部湿疮、带下以及湿热成痿诸症的首选方剂，临床运用甚广，被收录在2005版药典…。本次实验针对二妙丸服用量大，携带不方便的特点，拟将丸剂改为胶囊剂，以减小服用量，提高药物的稳定性和生物利用度。苍术健脾燥湿为方中君药。黄柏为芸香科植物黄柏Phellodendmnam illnse Rupr(关黄柏)和黄皮树Phellodendron ehinse Sehneid(川黄柏)的除去栓皮部分的树皮，为中医临床常用的中药材之一，具有清热、燥湿、泻火、解毒之功效。文献报道，黄柏主要含有小檗碱、木兰碱、黄柏碱、掌叶防己碱等多种生物碱及内酯、甾醇、黏液质等成分，为了更好的发挥黄柏的药用功效，本实验采用正交实验设计法，以盐酸小檗碱的含量和出膏率为检测指标，考察溶媒浓度、溶媒用量、提取时间及提取次数等4种因素对提取工艺的影响，并对提取工艺进行优选。 1　仪器与试药 黄柏，购于四川。盐酸小檗碱化学对照品批号：110713―200609。购自中国药品生物制品检定所。岛津LC-10A高效液相色谱仪、浙大N3000色谱工作站、电子分析天平等。其它试剂均为分析纯。 2　方法与结果 2.1　正交试验设计表的设计 根据初筛试验结果，分别确定提取溶媒(乙醇)浓度、溶媒用量、提取时间及提取次数为实验因素，每个因素选择3个水平的正交实验设计方案，见表1。 2.2　样品的制备 取黄柏(炒)药材25g，共取9份，按照表1、表2分别进行回流提取，提取液滤过，合并，回收乙醇，浓缩，定容到250mL的容量瓶中，取5mL到25mL的容量瓶中，甲醇定容，微孔滤膜过滤后，精密吸取10μL，注入高效液相色谱仪。 2.3　出膏率的测定 精密吸取滤液10mL，水浴蒸干，置于105℃烘箱中恒温干燥3h，取出置干燥器中1h，精密称定，计算浸膏得率。 2.4　盐酸小檗碱的含量测定 2.4.1　对照品溶液的制备精密称取盐酸小檗碱适量，溶解制成每1mL含0.28mg的溶液。 2.4.2　实验条件及系统适用性色谱条件：色谱柱为Diamortsil C18(5μm，4.6nm×150nm)；流动相为乙腈：0.025mL/L磷酸水溶液=1:3，检测波长265nm；柱温40℃；流速1mL/min。理论塔板数按盐酸小檗碱计算应不低于4000。 2.5　实验结果 以小檗碱和出膏率为指标，权重系数为60:40。见表2、表3。 由表2、表3可以看出，影响因素DA=CB，且因素D具有显著性，所以黄柏的最佳提取工艺为以D3A2C2B3。即黄柏的最佳提取工艺为10倍量的70％乙醇回流提取3次，每次1.5h。 3　讨论 黄柏的主要成分为生物碱，生物碱在水和醇中都有较好的溶解度，在选取黄柏的提取溶媒时，进行了单因素的考察，分别选用水，30％、50％、70％的乙醇为提取溶媒进行了预实验，得到70％乙醇提取的盐酸小檗碱的含量最大，且出膏率最低，适合工业化生产的要求，最终确定正交实验方案，得到二妙胶囊中黄柏的最佳提取工艺为10倍量的70％乙醇回流提取3次，每次1.5h。 本次实验在对黄柏的提取工艺进行考察时，选取了多指标综合考察的方法，以盐酸小檗碱和浸膏率为指标，权重系数为60:40，使实验结果更加科学，准确，合理。 1