天然药物化学试验指导.PDF

天然药物化学实验指导 温州医学院药学院 天然药物化学教研室 目 录 实验一 槐米中芦丁的提取 …………………………………1 实验二 粉防己生物碱的提取分离 …………………………6 实验三 薯蓣皂苷元的提取与鉴别…………………… …12 实验四 大黄中蒽醌类成分的提取分离和鉴定…………… 14 实验五 小檗碱与小檗胺的提取分离…………………… …24 2 实验一 槐米中芦丁的提取 一、实验目的： 1、以芦丁为例掌握黄酮类成分提取的原理和方法 2 、掌握黄酮类成分的主要性质及黄酮苷、苷元和糖的鉴定 二、仪器和试药： 试药：槐米、标准品（芦丁、槲皮素、葡萄糖、鼠李糖）、石灰乳、1%硫酸、 正丁醇：醋酸：水（4:1:5 ）、15%醋酸、邻苯二甲酸-苯胺、镁粉、浓 HCl 、2 ％AlCl 乙醇溶液、1％FeCl 乙醇溶液、5 ％中性醋酸铅乙醇溶液、 3 3 α－萘酚试液、浓H SO 、2 ％二氯氧锆乙醇溶液、2 ％枸橼酸乙醇溶液、 2 4 95 ％乙醇、乙醇、甲醇 仪器：铜舂、电热套、烧杯（500ml、200 ml 各2 ）、玻璃棒、温度计、纱布、 试管、滴管、滤纸、点样毛细管、电吹风、玻璃棒、PH 试纸、玻璃漏 斗、布氏漏斗、抽滤瓶 、循环水泵、天平、量筒（100ml、10ml 各1）、 紫外灯等 三、方法和步骤 （一）芦丁的提取 1、碱提 第一次提取：称取槐花米20 克，置于铜舂中捣成粗粉。将粉碎 的槐花米置于 500ml 烧杯中，加水 300ml，煮沸。搅拌下缓缓加入 石灰乳，调节pH 值至8—9，加热，微沸30min，随时补充失去的水 分并保持溶液pH 值8—9。倾出上清液，趁热抽滤。 第二次提取：药渣再用 200ml 水煮沸 30min，随时加水补充失 去的水分。 合并两次滤液。 1 2 、酸沉 滤液放置冷却至60~70℃，小心滴加浓HCl，同时快速搅拌，调 节pH 值至4—5 。静置1 小时，析出沉淀（粗制品芦丁），减压抽滤。 用少量蒸馏水（约10ml）洗涤芦丁粗品，抽干。 3、重结晶 将粗品芦丁悬浮于蒸馏水中，加热煮沸15min，至芦丁全部溶解， 趁热立即抽滤。冷却后即可析出结晶，抽滤，得芦丁精制品。 （二）芦丁的水解 精密称取芦丁 1 克，加1%硫酸 100ml，小火加热微沸30min 。 放冷，抽滤得槲皮素结晶，所得沉淀用少许水洗除酸。用乙醇（95% 大约10ml）重结晶。 取上述水解母液，小心用Ba(OH)2 中和至中性，过滤出生成的 BaSO4沉淀，滤液用热水浴小心浓缩至小体积备用。 （三）、芦丁和槲皮素的色谱鉴定 薄板：硅胶GF254 ，色谱用，2.5cm×7.5cm 样 品：各取少量自制芦丁和槲皮素，分别用95%乙醇溶解， 标准品：芦丁、槲皮素标准品的95%乙醇溶液 展开剂：（1）正丁醇-醋酸-水（BAW 系统，4 : 1 : 5, 上层） （2 ）HOAc-H2O （15 : 85） 显 色：（1）可见光下观察； （2 ）再在紫外光下观察 实验结果记录：观察斑点颜色，记录图谱并计算Rf 值。 2 （四）糖的色谱鉴定 薄板：硅胶GF254 ，色谱用，2.5cm×7.5cm 样 品：各取少量自制浓缩糖溶液；葡萄糖、鼠李糖对照品水 溶液标准品：芦丁、槲皮素 展开剂：正丁醇-醋酸-水（BA