ADAM10缺失对CaMKⅡα基因表达，胶质细胞增殖及突触可塑性的影响.docVIP

　　ADAM10 缺失对 CaMKⅡα 基因表达，胶质细胞增殖及突触可塑性的影响 1.前言 去整合素和金属蛋白酶作为一类 Zn2+依赖性的 I 型跨膜蛋白质，由去整合素（disintegrin）和金属蛋白酶（metalloproteinase）两个结构域所组成。ADAM10 作为 ADAM 家族的成员之一，是一个非常关键的调节性去整合素和金属蛋白酶。其作用底物包括 Notch、APP、 Ephrin 和 Cadherin 等 30 余种跨膜蛋白质，这些底物分子均在中枢神经系统中发挥着极其重要的作用[2-5]。另外，ADAM10 在神经系统发育中起到调节作用，它影响着细胞增殖、迁移、分化，对于维持神经细胞的生存,轴突生长及髓鞘化也有着重要的意义[6,7]。在选择性敲除小鼠神经干细胞的 ADAM10 基因的研究中, 小鼠大脑皮层发育出现了明显的异常, 发生了神经元的分化和迁移异常[18]。ADAM10 的调节机制主要分为两个大类：一类是通过膜外结构域脱落（ectodomain shedding）的方式水解跨膜蛋白质，进而激活其介导的信号转导途径，上调或下调靶基因的表达，从而发挥其生物学功能。另一类是通过某些未知的调节机制，调节诸如 CaMKⅡalpha;、S100a8/9、Fabp7 和 Nlgn1 等基因 mRNA 的表达水平，参与中枢神经系统的发育、突触连接、细胞通讯和信号传递。ADAM10 和 CaMKⅡalpha; 均是 Alzheimer 病（AD）的易感基因[19]，其中，ADAM10 与迟发性 AD 密切相关[20]。Prinzen 等用基因芯片筛查 ADAM10 及其显负性突变型 dnADAM10 转基因小鼠的大脑时发现，ADAM10 基因高表达时，CaMKⅡalpha; 基因表达上调 1.779 倍，抑制性 dnADAM10 基因高表达时，CaMKⅡalpha; 基因表达下调 0.686 倍[21]。 突触的长时程增强(long-term potentiation，LTP),是反映突触可塑性的重要指标之一。它能够加强兴奋神经元之间的联系，同时也被作为研究学习和记忆机制的细胞和电生理模型,与学习和记忆能力有着极其密切的联系。因此，对于海马区 LTP 的研究，就成为了探索人类神经系统疾病发病机制的重要途径之一[8]。大量的研究发现，钙调素依赖性蛋白激酶 CaMKⅡalpha;是脑内含量最丰富的激酶之一，尤其在海马中大量表达。海马内 CaMKⅡalpha;的表达对于神经元的可塑性、基因表达和学习记忆起着重要作用[9]。研究发现 CaMKⅡalpha;与 AD 关系密切。在tau 蛋白的过度磷酸化中可能起着作用[10,11]。CaMKⅡalpha;亚单位基因突变或使用CaMKⅡ抑制剂后，小鼠空间学习能力将受到损伤，海马脑片上 LTP 的诱导也受到抑制。由此可见，CaMKⅡalpha;的激活对于基因的表达,神经元的突触可塑性,乃至学习和记忆都发挥着至关重要的作用。在 PS 受损的研究中, CaMKⅡalpha;表达异常，LTP 出现受损，Tau 蛋白异常，进一步造成了神经发生异常[17]。LTP 的研究表明，大脑的许多区域中的 LTP 诱导发生被抑制的时候，海马等脑区的神经元发生了明显的退化性凋亡，出现了神经元丢失，这有可能是病人临床表现中，出现学习、认知和记忆等能力的衰退或者缺损的主要原因。因此，我们可以通过CaMKⅡalpha;的表达变化和 LTP 的测定两项指标，来研究 ADAM10 基因缺失对神经细胞功能的影响。进一步探讨 ADAM10 对 CaMKⅡalpha;的调节机制，ADAM10对 LTP 诱导的影响及 ADAM 缺失是否会引起神经元丢失。有研究表明，中枢神经系统受到严重的损伤，或者发生疾病时,其过程中会产生炎症反应，并伴随着胶质化过程的发生。该过程的主要特点是 GFAP 蛋白表达上调，新生胶质细胞的突起及胞体会比较肥大,但是在健康的胶质细胞中却没有检测到 GFAP 蛋白表达增高[12]。胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidicprotein,GFAP)是成熟星形胶质细胞中所特有的中间丝成分,它在神经系统的生理功能和病理发生过程中发挥着极其重要的作用,被广泛应用为星形胶质细胞的标记物。GFAP 归类于Ⅲ型中间丝,它是星形胶质细胞的主要中间丝蛋白,有利于维持细胞正常的形态和功能，在多种病理变化过程(例如神经退行性病、癫痫)中起着非常重要的作用。星形胶质细胞的功能主要是调节细胞外离子浓度和化学环境，支持脑血屏障，同时为神经组织提供营养物质，并且在大脑瘢痕修复过程中起重要作用。星形胶质细胞的突起充满在神经元胞体和突起之间，能够为神经元提供营养和支持作用，在炎症过程中星形胶质细胞活化，大量增