FGF23过表达对小鼠肾、肝和海马中SOD、GSHPX活力和MDA含量的影响.docVIP

　　FGF23过表达对小鼠肾、肝和海马中SOD、GSHPX活力和MDA含量的影响 【摘要】 目的：研究成纤维细胞生长因子(FGF)23过表达对小鼠肾、肝和海马组织中氧化及抗氧化系统的影响，探讨FGF23过表达致衰老的可能机制。方法：采用8周龄过表达人FGF23转基因小鼠模型，检测转基因和野生型小鼠血清磷水平，测定肾、肝和海马组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPX)的活力以及丙二醛(MDA)的含量。结果：与野生型小鼠相比，FGF23转基因小鼠血清磷水平显著降低(Plt;0.001);肾组织中SOD和GSHPX的活力均显著降低(Plt;0.001)，MDA的含量显著升高(Plt;0.001);海马组织中SOD和GSHPX的活力明显降低(Plt;0.05或Plt;0.01)，MDA的含量明显升高(Plt;0.01)。肝组织中SOD、GSHPX的活力和MDA的含量与野生型小鼠相比差异不显著(Pgt;0.05)。结论：FGF23过表达能够导致肾和海马组织氧化损伤，FGF23过表达致衰老与这些组织中氧化与抗氧化系统的失衡有一定的关系。 【关键词】 成纤维细胞生长因子23; 超氧化物歧化酶; 谷胱甘肽过氧化物酶; 丙二醛; 衰老 　　[Abstract] Objective: To investigate the effects of fibroblast gros in mouse renal, hepatic and hippocampal tissues in order to elucidate the mechanism of aging caused by FGF23 overexpression. Methods: The serum phosphate levels, superoxide dismutase(SOD) and glutathione peroxidase(GSHPX) activity and malondialdehyde(MDA) contents easured and analyzed by the parison of eightice overexpressing human FGF23 to their agematched ates. Results: pared ates, serum phosphate level of FGF23 transgenic mice pal tissue. Hopal tissues ay be contributed to the aging caused by FGF23 overexpression. 　　[Key utase; glutathione peroxidase; malondialdehyde; aging 　　成纤维细胞生长因子(fibroblast grom)提取DNA进行PCR扩增鉴定，8周龄时用于实验研究。每组8只，雌雄各半，采用同窝同性别配对。FGF23基因引物序列：上游5′CTCTGGGTCTGTGCCTTGTGC3′，下游5′GGAGTACGG 　　GGGTGGGTTCAT3′，PCR扩增片段长度为444 bp。内参GAPDH引物序列：上游5′CATTTCACTCAAGGTTGT 　　CAGC3′，下游5′ATCATACTTGGCAGGTTTCTCC3′，PCR扩增片段长度为346 bp。引物由上海Invitrogen公司合成。 　　1.2 血清磷检测 　　两组动物经 电子 天平称质量后，7.5%(5 μl·g-1)水合氯醛腹腔注射麻醉，剥离胸部皮肤，经胸腔外心脏穿刺取血，4 000×g离心5 min，取上清制成血清样本，按磷检测试剂盒要求检测血清磷水平。无机磷检测试剂盒购自南京建成生物工程研究所。 　　1.3 组织匀浆制备与超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPX)活力和丙二醛(MDA)含量测定 动物经脱颈处死后，打开腹腔取出肾、肝，断头取脑，迅速分离海马，将肾、肝、海马置于冰上，称质量后加入预冷的生理盐水，按试剂盒要求制备组织匀浆。SOD和GSHPX活力检测分别采用黄嘌呤氧化酶比色法和还原型谷胱甘肽消耗法，MDA含量测定采用硫代巴比妥酸法，测试仪器为上海尤尼科V2102型分光光度计。组织蛋白定量按考马斯亮兰试剂盒说明书测定。上试剂盒均由南京建成生物工程研究所提供。 　　1.4 统计学处理 　　检测所得数据以±s表示，采用t检验进行统计学处理，Plt;0.05为差异有统计学意义。 　　 2 结 果 　　2.1 基因型鉴定结果 　　基因型鉴定结果显示，野生型小鼠只有346 bp条带，因为其PCR产物中仅有内参G