Ghrelin对MPTP小鼠帕金森病模型黑质TH、Bcl2和BaxmRNA表达的影响.docVIP

　　Ghrelin 对MPTP小鼠帕金森病模型黑质TH、Bcl2和Bax mRNA表达的影响 【摘要】 目的 探讨Ghrelin对1甲基4苯基1，2，3，6四氢吡啶（MPTP）造成的黑质（SN）多巴胺能神经元损伤的保护作用及可能机制。方法 小鼠随机分为对照组、MPTP组和Ghrelin+MPTP组。腹腔注射MPTP制备帕金森病小鼠模型；Ghrelin+MPTP组于MPTP注射前，侧脑室微量注射Ghrelin 200 ng，共8 d；对照组以等量生理盐水取代Ghrelin和MPTP。应用半定量RTPCR技术检测各组小鼠SN内酪氨酸羟化酶（TH）、Bcl2和Bax mRNA的表达情况。结果 MPTP导致小鼠SN内TH mRNA的表达明显低于对照组(F=34.77，q=11.91，Plt;0.01)，Ghrelin预处理小鼠SN内TH mRNA表达量较MPTP组明显增加(q=5.05, Plt;0.01)。MPTP导致小鼠SN内Bcl2/ Bax由对照组的1.13±0.03减少至0.47±0.06 (F=111.59，q=17.58,Plt;0.01)，Ghrelin预处理小鼠Bcl2/Bax明显高于MPTP组(q=18.94,Plt;0.01)，可恢复至正常水平。结论 Ghrelin预处理对于MPTP造成的TH基因表达量减少有改善作用，该作用可能通过抗凋亡途径实现。 【关键词】 Ghrelin 帕金森病 1甲基4苯基 四氢吡啶 酪氨酸单氧化酶 细胞凋亡 ［ABSTRACT］ObjectiveTo investigate the effect of Ghrlein on tyrosine hydroxylase (TH), Bcl2 and Bax mRNA expression of the subatantia nigra in 1methy4phenyl1,2,3,6tetrahydropyridine (MPTP)induced mouse model of Parkinson disease. MethodsEighteen healthy male C57BL/6 mice ：Control, MPTP and Ghrelin+MPTP. The mice in MPTP group g/kg, i.p.), once daily for five days, al saline. The total mRNA of the substantia nigra (SN) RNA expression of TH, Bcl2 and Bax by semiquantitive reverse transcription polymerase chain reaction. Resultspared RNA expression (Plt;0.01). Pretreated RNA expression pared RNA expression induced by MPTP. The antiapoptotic pathight be the mechanism of this neuroprotective effect. ［KEY A等[2]于1999年发现的一种脑肠肽, 由28个氨基酸组成，为生长激素促分泌素受体(GHSR)的内源性配体, 有刺激食欲、促进摄食、减少能量消耗、增加体质量的作用。最近的研究表明，Ghrelin能够刺激多种细胞的增殖并能抑制凋亡。ZIGMAN等[3]利用组织原位杂交技术检测Ghrelin功能性受体——GHSR 1a mRNA 在大小鼠脑内的分布，发现在SN的TH 免疫阳性神经元上有GHSR1a的表达。为研究Ghrelin是否具有保护PD动物模型SN内DA能神经元的作用，本实验应用半定量逆转录聚合酶链反应（RTPCR）技术，对1甲基4苯基1，2，3，6四氢吡啶（MPTP）制备的C57BL/6 小鼠PD模型SN内酪氨酸羟化酶（TH）、Bcl2和Bax mRNA表达量进行了检测，对Ghrelin的神经保护作用及其可能的机制进行了初步探讨。 1 材料与方法 1.1 材料 MPTP、Ghrelin（Sigma公司），TRIzol试剂（Gibico公司），逆转录试剂盒（Promega公司），Tag DNA聚合酶以及DNA Marker DL2000（TAKARA公司）。 1.2 动物分组 选择健康雄性C57BL/6小鼠18只，8～10周龄，体质量（20±2）g，由北京维通利华实验动物有限公司提供,其合格证号为：scxk（京）20020003。置于（19±2）℃室温下，安静环境饲养，昼夜循环光照，自由饮水