hLYZ转基因羊粪便对于土壤生物群及基因漂移之影响.docVIP

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hLYZ转基因羊粪便对于土壤生物群及基因漂移之影响.doc

  hLYZ转基因羊粪便对于土壤生物群及基因漂移之影响 第一章 绪 论 1.1转基因动物的研究进展 转基因动物主要是指人类通过各类方法使其基因组发生改变并可以稳定遗传的动物。随着动物克隆技术,基因打靶技术,蛋白转导技术等一系列生物学技术手段的发展和广泛应用,人们对生物基因组精确改造程度越来越高,可以完成在时间、空间上定点调控基因表达等复杂的转基因。以实验研究和商业应用为目的的转基因动物研究始于30 年前,而如今其发展的规模正日益扩大,发展速度逐日增长。而转基因技术在近几年更是逐渐成为 21 世纪全球经济发展的新动力、新引擎,它在改善环境问题、缓解资源短缺、保障粮食安全、开拓农业新功能等方面显示出了极大的潜力,并且逐步发展成为强大的现代生物科技产业。现在通过转基因技术将特异的外源基因导入动物中,可以使之产生新的奶制品、肉制品或相关产品,能对环境控制、生物医药或其他方面发挥重要作用。同时利用转基因技术也可以转入外源基因进行动物品种改良,提高动物的牛奶、肉质品质、繁殖能力等。与此同时,转基因动物研究的发展迅速及广泛应用也带来了一系列问题,人们对转基因动物褒贬不一。 1.1.1 转基因动物的研究及应用 1.1.1.1转基因动物研究现状 转基因动物主要是指人类通过各类方法使其基因组发生改变并可以稳定遗传的动物。随着动物克隆技术,基因打靶技术,蛋白转导技术等一系列生物学技术手段的发展和广泛应用,人们对生物基因组精确改造程度越来越高,可以完成在时间、空间上定点调控基因表达等复杂的转基因。Palmiter 等(1982)将大鼠生长激素基因注射到小鼠的受精卵中,得到了转基因超级小鼠,该鼠体重是对照组的近 2 倍,证实了转基因技术可以改变动物的表现型。此后转基因技术飞速发展,利用显微注射技术科学家相继获得了转基因兔、羊、猪等(Hammer et al. 1985)。而 Gordon 等人(Gordon et al. 1987)从小鼠乳腺中分离到了组织型纤溶酶原激活剂(tissue plasminogen activator,tPA),从而提出了构建乳腺生物反应器的设想,引起了利用转基因动物来生产药用到那边的研究热潮。之后,世界各国实验室都争相开始着手转基因技术的研究,并获得了一系列的重大成功(图 1-1)。而 McCreath 等人(2000)首次利用打靶技术获得了基因定点修饰的转基因羊,这项成果更是标志着打靶技术和克隆技术的完美结合,从此转基因动物研究进入蓬勃发展的新时代。 而山羊由于其皮毛肉奶的兼用性,已成为与人类生活密不可分的家畜之一,如何利用转基因技术进行山羊品种改良以及利用山羊乳腺生物反应器生产药物蛋白已成为国内外竞相研究的热点。到目前为止,关于转基因羊的研究已经取得了突破性的进展(冯颖等 2011)。1991 年,首例利用显微注射技术的转基因山羊出生(Eberl et al. 1991)。1998 年,首例大量表达药用蛋白的转基因羊诞生(Edmunds et al. 1998);2001 年,首例体细胞克隆转基因羊诞生(Reggio et al. 2004);2004 年,首例由腺病毒载体介导的转基因山羊出生(Saacute;nchez et al. 2004);2006 年,首例 RNAi 转基因山羊诞生(Golding et al.2006);2008 年,首例运用基因打靶技术制备的转基因山羊出生(Honaramooz et al. 2008)。2006 年,GTC 生物公司利用转基因羊生产的重组人抗凝血酶 IIIATryn获得欧洲药品局的认证并被批准上市(王红娜等 2010),这项举措不但是转基因羊研究的重大突破性进展,更标志着已经发展 20 多年的转基因动物研究逐渐步入成熟的阶段,产业化发展逐步形成规模化。随着转基因技术的不断发展,尤其是同源打靶技术的介入,转基因制备的成本已大大降低,这就为转基因家畜的产业化发展开拓了更加广阔的前景。 1.1.1.2转基因技术在转基因动物中的应用 转基因动物的应用可以根据其研究方向分为两大类:具有生产价值的转基因动物和具有科研价值的转基因动物。具有生产价值的转基因动物制备目的主要有获取器官移植供体、获得药用蛋白、工业用蛋白、改良动物品质等;而具有科研价值的转基因动物大多其制备目的为研究一个或一组基因的功能及调节方式,从而研究人类疾病的发病机理,或者研究药物或其他医疗手段的合理有效性等。尽管上述转基因动物的制备目的不同,但它们都为我们人类的科技发展进步,生产生活质量提高等做出了巨大贡献。 第二章 材料和方法 2.1 试验分组 于 10 月 31 日采取 0-5cm 的表层土样品,在分别距离转基因羊的羊圈 0、50m、正常羊的羊圈 0、50m、以及羊场外空地处(对照组)采集,每个采样点采集 3 个

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