α-双炔失碳酯对激素依赖人前列腺癌细胞LNCaP生长的影响.docVIP

　　α?双炔失碳酯对激素依赖人前列腺癌细胞LNCaP生长的影响 【摘要】 目的 探讨双炔失碳酯α单体（α?anordrin, α?ANO）对激素依赖人前列腺癌细胞LNCaP生长的影响。 方法 采用氧化铝柱层析分离纯化双炔失碳酯(ANO)的α和β差向异构体，SRB细胞染色法检测α?ANO对LNCaP细胞生长的影响及对抗雄激素拟似剂R 1881促细胞生长的作用；观察α?ANO作用下细胞形态学变化；ELISA法检测α?ANO对LNCaP细胞分泌前列腺特异性抗原（PSA）的影响。 结果 常规培养液中α?ANO（8,12,16,24,32 μmol/L）作用LNCaP细胞后，细胞存活率分别为85.8%，51.5%，40.8%，29.2%，1.0%；在去除激素培养液中，α?ANO抑制细胞生长作用更强，能对抗R1881的促细胞生长作用，经α?ANO处理的LNCaP细胞分泌PSA能力降低。 结论 α?ANO抑制激素依赖人前列腺癌细胞LNCaP的增殖，具有抗雄激素促细胞生长的作用。 【关键词】 前列腺肿瘤; 去甲雄烷类； 选择性雌激素受体调节剂； 前列腺特异抗原； 细胞系，肿瘤 　　ABSTRACT: Objective To investigate the effects of α?anordrin（α?ANO）on the groan prostate cancer cell line LNCaP. Methods The monomers of α?ANO and β?ANO ina column chromatographic separation. SRB staining method ulant) in inducing LNCaP cells proliferation. Cell morphology ined under microscope. ELISA ine the effect of α?ANO on PSA secretion by LNCaP cells. Results In normal medium，after LNCaP cells ol/L，cell survival rates edium, α?ANO could antagonize LNCaP cell proliferation induced by R1881. The PSA secretion of LNCaP cells an prostate cancer cell line LNCaP. In the presence of androgen, α?ANO antagonizes the LNCaP cell proliferation induced by androgen. 　　KEY ）是指能与雌激素受体相互作用，依据靶组织和激素内环境的不同而产生特异作用的-类化合物。它们对雌激素有双相作用，即能抗雌激素又具有拟雌激素样作用。SERM已被证实可治疗乳癌、骨质疏松和心血管疾病；并可能预防前列腺癌（prostate cancer, Pca）[1?2]。寻找新的理想的SERM是目前研究热点。 　　双炔失碳酯（2α，17α?双乙炔基A环?失碳雄烷?2β，17β双羟基双丙酸酯,anordrin,ANO）是甾体A环失碳雄甾烷衍生物[3]，临床上用于抗着床、抗早孕。药理活性研究表明ANO具有强的抗雌激素作用和弱的雌激素样活性[4]，与SERM类药物特点相似。文献报道，ANO在合成过程中，同时生成2个炔基构型不同的异构体: α?ANO和β?ANO。α?ANO对多种肿瘤细胞包括HL?60、人卵巢癌细胞等有直接杀伤作用[5]。笔者观察α?ANO对激素依赖人前列腺癌细胞LNCaP生长的影响，报道如下。 　　1 材料和方法 　　1.1 材料 　　1.1.1 试剂与仪器 ANO（上海信谊医药集团），纯度均gt;99%；R1881（Methyltrienolone，美国加洲大学洛杉矶分校癌症中心陈德桂博士惠赠）；RPMI 1640培养基，IMDM，无酚红IMDM，胎牛血清，活性炭处理的血清(CS?FBS)，含0.02%EDTA胰酶（美国Gibco公司）；前列腺特异抗原（prostate specific antign,PSA)ELISA试剂盒（美国DSL公司）；罗丹明B(SRB)（美国Sigma公司）；CO2培养箱（美国Forma Scientific公司）；倒置相差显微镜（日本Olympus 公司）；酶标仪550型（美国Bio?Rad公司）。 　　1.1.2 细胞株与细胞培养 人前列腺癌细胞LNCaP（美国加洲大学洛杉矶分校癌症中心陈德桂博士惠赠）。LNCaP培养于含10%胎牛血清、青霉素100 IU/mL、链霉素100 IU/mL的IMDM