不同接种物活性对快速生物降解测试结果影响.docVIP

　　不同接种物活性对快速生物降解测试结果影响 第一章绪论 1.1化学品的污染及其危害 化学品对人类生活和生产有着极为重要的意义和作用，随着科学和经济水平地提高，特别是化工、农药等行业的迅速发展，有机化学品的产量和种类与日俱增，并且全世界每年有1000~2000种新化学物质问世，广泛应用于人类的生活和生产中，为人类和社会提供更多服务，丰富人们的生活。但是化学品污染程度和范围令人惊叹，尤其是经济迅速发展的国家和地区，那些有毒、难降解的化学品对人类、环境的污染和危害已成为当今世界上急需解决的重大问题。由于化学品种类较为繁多、性质复杂等特性，在其生产、储存、转移、使用及处置过程中，往往存在危害人体健康和生态环境的极大可能。从1960年开始，大部分人工合成的难降解化学品进入生态系统，在野生动物体内得以传递、积累和富集导致物种生殖繁衍衰竭和野生动群雌性化等现象P]，最后通过食物链转移到人体和生态环境中，严重威胁人体健康与生态环境稳定。大多数的化学品都具有毒性，有一部分甚至为剧毒，然而这些有毒化学品对人类健康会产生危害，并且对环境破坏相当严重。化学品对人体的危害程度与其浓度及摄入量有直接关系，浓度越高，毒性越大；摄入量越大，对人体伤害越严重。 . 1.2新化学品生物降解性测试 新化学品是指人们新开发合成出来的化学品。由于其危险性未知，政府管理部门通常要求其生产者或引进者必须事先进行申报，提供该新化学品的物理化学特性、生态毒性和健康毒性等数据，相关政府部门经过审核后确认其危害和风险可接受后，才允许其上市[8]。随着化工产业的飞速发展，新化学品的种类和数量逐年剧增，这些化合品可以通过生产、使用和排放等多种途径进入到水体、沉积物等多种环境介质中，对人类健康和整个生态系统都存在着极大的潜在风险和安全隐患。中国生产或者进口的现有化学品己达45612种，其中列入《危险化学品目录》（2012版)的有3000多种，数十种国际上和发达国家己禁止或严格限制的危险化学品目前国内仍在生产和使用[9]。因此，了解清楚这些化学品在环境中的迁移归宿非常重要，化学品的风险评估常用于预测化学品在环境中的归宿，在化学品的风险评估中，生态毒理测试尤为重要，生物降解性测试则是其重要的组成部分。国际上一些组织机构，例如国际标准组织（ISO)、欧洲经济合作与发展组织(OECD)、欧盟（EC)、美国环保局（USEPA)制定了一系列化学物质的生物降解性标准测试方法，并规定须对化学品的生物降解性能进行评估和审查后才能采取一定的管理措施。国内也出台了为了应对欧盟《关于化学品注册、评估、许可与限制》（简称REACH)的新法规，全国危险化学品管理标准化技术委员会（TC251)组织相关单位按照等同采用OECD测试标准的原则，于2008年颁布实施了有关化学品生物降解性国家标准，快速生物降解测试（OECD 301系列）是国际和国内使用的生物降解蹄选试验表现最突出的一组方法，在欧盟的环保化学品分类和环境风险评估的暴露评估(EEC, 2003)发挥了重要的作用的过程[13]。 . 第二章活性污泥酶活测定方法优化 2.1概述 目前，活性污泥的酶活性通常采用酶催化反应过程中其作用产物的形成速率或作用底物的利用速率表示活性污泥的酶活性。据报道，在污水处理中，蛋白酶、（X-B比喃葡糖苷酶、脂肪酶、酷酶在主要组分的水解中发挥重要作用。碱性憐酸酶水解憐酸单酯，为细胞提供憐的替代[67]。脱氧酶主要负责氧化脱氧，为细胞提供能量[。在测定过程中，反应pH、反应温度、反应时间以及酶反应终止剂或者方法都会影响所测酶活的大小。然而，对活性污泥中这六种酶活性条件和操作，除脱氢酶外，尚没有较为系统的报道以及标准方法，也未见对其最佳测定条件进行完整系统性的优化本研究对活性污泥中上述六种酶进行测定以及条件优化，进而提出快速测定活性污泥酶活的方法。 . 2.2结果与讨论 反应体系加入10M NaOH，会导致4-硝基苯掠榈酸盐、双-(4-确基苯)磷酸酯、4-硝基-a-n比喃葡萄糖苷水解成为4-确基苯酷，L-亮氨酸-4-摘基苯胺则直接水解出4-硝基苯胺，影响实际的酶活测定结果，如表2-2，使数值降低到接近0。从表2-2结果可见，反应体系加入0.1ml 10% TCA时，水解酶酶作用产物由黄色变为无色，影响结果，其水解酶作用产会随着pH的变化最大吸收波长发生偏移。水浴加热10分钟，能有效地终止L-亮氨酸氨基肽酶(L-AP)、棕榈酸脂肪酶(LIP)、磷酸酯酶（PPA)、a-GLC (a-Btt喃葡萄糖苷酶）的反应，对碱性憐酸酶（APA) 10 MNaOH、99deg;C均能有效地终止APA反应(表2-2)。比较3种终止方法，发现99deg;C能终止6种酶反应，采取99deg;C水浴加热10分钟作为APA终止方法使试验更加方便快捷。DHA反应后，