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参麦注射液对大鼠缺血再灌注心肌CaN活性的影响.doc
参麦注射液对大鼠缺血再灌注心肌CaN活性的影响
【关键词】 参麦注射液;心肌缺血;再灌注损伤
【ABSTRACT】Objective:To investigate the effects of Shenmai injection(SMI)on activity of calcineurin during myocardium ischemia-reperfusion in rats.Methods:24 rats ly into 3 groups(n=8):sham-operated group,myocardial ischemia-reperfusion(MIR)model group and SMI group.The activity of calcineurin(CaN)inutes ischemia and 2 hours reperfusion.Results:pared -operated group,the activity of CaN increased significantly(Plt;0.01)in MIR model group;and pared odel group,the activity of CaN decreased significantly(Plt;0.01)in SMI group.Conclusion:Shenmai injection can protect the myocardial function by decreasing CaN activity on ischemia-reperfusion myocardium in rats.
【KEY yocardial ischemia,Reperfusion injury
目前,临床上运用经皮腔内冠状动脉成形术(PTCA)、冠状动脉旁路搭桥手术和溶栓等手段来治疗急性心肌梗死(AMI),使缺血心肌在短时间内恢复血供,及时清除代谢废物并提供氧气和营养物质,有利于减轻缺血损伤,使AMI 的治愈率和生存率得到显著提高。但是,某些情况下再灌注后可出现严重的心律失常和心功能不全,即出现心肌缺血再灌注损伤(myocardial ischemia-reperfusion injury,MIRI)。因此,如何防止MIRI产生或减轻其程度就成为一研究热点。参麦注射液(Shenmai injection,SMI)源自《症因脉治》的参麦饮,是将红参和麦冬经过加工、提取、精制而成的注射液,具有益气养阴、生津复脉之功效。有临床研究[1]报道,在AMI患者溶栓治疗同时静滴参麦注射液,可有效改善心肌微循环,增强心功能,降低心律失常的发生率和住院期间死亡率。但有关参麦注射液的保护作用机制研究仍较少。钙调神经磷酸酶(calcineurin,CaN)是一种受Ca2+/钙调素(calmodulin,CaM)调节的丝/苏氨酸蛋白磷酸酶,在体内分布广泛,作为多功能信号酶,参与多种细胞的信号转导和功能调节。有研究表明,CaN介导了MIRI中的心肌细胞凋亡[2],而也有实验证实参麦注射液能有效减轻缺氧-复氧心肌细胞内Ca2+的超负荷,减少细胞凋亡的发生[3]。但参麦注射液对CaN的影响尚未见报道。本实验从心肌CaN活性变化方面探讨了参麦注射液对急性缺血再灌注心肌的影响,从而为其临床应用提供 科学 的实验依据。
1材料和方法
1.1实验动物分组
健康IR)model group]和参麦注射液治疗组[Shenmai injection(SMI)group],每组8只。
1.2实验仪器、药品和试剂
756MC紫外分光光度计(上海精密科学仪器有限公司);Labofuge 400型高速低温离心机(德国科俊);DHX-150型动物呼吸机(成都仪器厂)。参麦注射液(每支10mL,含红参、麦冬生药各1g,神威药业有限公司生产);氨基甲酸乙酯(北京化学试剂公司);CaN测定试剂盒(南京建成生物工程研究所)。
1.3动物模型制备
参照 文献 [4]的方法,稍加改良。先从腹腔注射20%氨基甲酸乙酯(5mL/kg)麻醉大鼠,后将其仰卧固定于鼠板,颈部手术分离气管,进行气管插管,并连接动物呼吸机,实行正压人工呼吸。将针形电极插入四肢皮下,记录标准肢体Ⅱ导联心电图。开胸暴露心脏,用4/0连线圆针从左心耳下1mm处浅层心肌穿过。假手术组:只穿线不结扎,2.5h后取材检测;心肌缺血再灌注模型组:在心肌和结扎线之间放置直径约2mm的医用硅胶管后结扎冠状动脉左前降支(LAD),以心电图Ⅱ导S-T段明显抬高,且结扎线下部心肌颜色明显变暗为模型制备成功,缺血30min后松开结扎线施行再灌注,与此同时从股静脉注射生理盐水(10mL/kg),再灌注2h后观察结果
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