新型格列酮类化合物ANY2对原代大鼠前体脂肪细胞糖脂代谢的影响.doc

　　新型格列酮类化合物ANY2对原代大鼠前体脂肪细胞糖脂代谢的影响 【摘要】 　　目的 研究新型格列酮类化合物ANY2对原代大鼠前体脂肪细胞糖脂代谢的影响。方法 ①用Ⅱ型胶原酶消化法得到原代大鼠前体脂肪细胞接种于24孔细胞培养板，以诱导培养基诱导分化，油红O染色法观察化合物ANY2对前体脂肪细胞分化的影响，并用异丙醇萃取油红O测定吸光度，比较各组分化程度。②以高浓度地塞米松作用于分化的脂肪细胞，制备胰岛素抵抗模型，观察化合物ANY2对胰岛素抵抗脂肪细胞葡萄糖消耗量(GC)和游离脂肪酸(FFAs)溢出量的影响。结果 浓度为1.1mg·L-1的化合物ANY2能显著促进前体脂肪细胞分化，分化率高达152%，提高其储脂能力，增加小脂肪细胞数量；提高胰岛素抵抗脂肪细胞糖耗量达363 mg·mg pro-1，减少其游离脂肪酸溢出，溢出量仅69 mmol·mg pro-1。结论 化合物ANY2可促进原代前体脂肪细胞分化充脂，并改善高浓度地塞米松所导致的胰岛素抵抗作用。 【关键词】 原代前体脂肪细胞；分化；脂肪酸溢出；胰岛素抵抗 　　Effect of Novel Thiazolidinedione ANY2 on Glyetabolism and Lipid Metabolism in Primary Precursor Adipose Cells 　　Abstract: Objective To investigate the effects of a novel thiazolidinedione ANY2 in primary precursor adipose cells.Methods 1.Using enzyme-digesting method,primary precursor adipose cells from the rat adipose tissues edium to induce the transformation of the cells and stained ethasone to build model of Insulin resistance cells.The effects of ANY2,including glucose consumption (GC) and FFAs releastion odel.Results ANY2 could significantly promote the differentiation on primary precursor adipose cells,increase consumption of glucose［363mg·(mg·pro)-1］ and reduce FFAs releastion［69 mmol·(mg·pro)-1)］under the state of insulin resistance.Conclusion pound ANY2 has remarkable effects on improving insulin resistence in adipose cells. 　　Key ary precursor adipose cells; differentiation; FFAs releastion ; insulin-resistance 　　脂肪组织具有重要的内分泌功能，由它产生众多的细胞因子和炎症因子，通过内分泌旁分泌和自分泌途径广泛影响机体物质和能量代谢过程，参与炎性反应，引起以代谢综合征、2型糖尿病为代表的胰岛素抵抗相关疾病的发生。 本实验以原代大鼠前体脂肪细胞为研究对象，观察新型格列酮类化合物ANY2对正常状态下脂肪细胞分化的影响及胰岛素抵抗状态下对细胞代谢活动的影响。 　 　1 材料与方法 　　1.1 药品和试剂 DMEM培养基，GIBCO公司；HEPES，Merk公司；Ⅱ型胶原酶，胰蛋白酶(1∶250)，AMRESCO公司；游离脂肪酸(FFAs)测定试剂盒和考马斯亮蓝法总蛋白测定试剂盒，均由南京建成生物工程研究所提供；葡萄糖试剂盒，由上海科欣生物技术研究所提供；胰岛素注射液(江苏万邦生化医药股份有限公司，400单位，10mL，批号070603)； 匹格列酮，上海兰生股份有限公司提供；ANY2由 中国 药科大学药物化学教研室提供，纯度为98.5%。其余试剂均为市售分析纯。 吡格列酮和化合物ANY2均用二甲亚砜(DMSO)助溶，再用PBS稀释至终浓度1.1 mg·L-1（DMSO终浓度＜0.01%）。 　　1.2 仪器和用具 精密 电子 天平(北京赛多利斯仪器系统有限公司)；LS-1F型超净工作台(上海索谱仪器有限公司)；YCP-200型CO2细胞培养箱(上海易亮医疗器械有限公司)