甲钴胺对大鼠坐骨神经损害后背根神经元Bcl2、Bax表达的影响.docVIP

　　甲钴胺对大鼠坐骨神经损害后背根神经元Bcl2、Bax表达的影响 ：苏建华, 林伟, 张俊华 唐金荣 肖杭 包德诚 【摘要】 目的： 探讨甲钴胺对坐骨神经损害后背根神经元保护作用机制。方法: 采用SD大鼠,随机分为正常组、模型组和甲钴胺组,预处理14 d后制作坐骨神经损害动物模型,分别在模型制备后12 h、24 h、48 h、72 h、5 d、7 d各组提取L1-5背根神经节,免疫组化染色 计算 Bcl2、Bax阳性细胞表达数。结果: 甲钴胺组于模型制备后12 h Bcl2即有明显表达,24～48 h达高峰,持续至7 d时与模型组比较差异有统计学意义(Plt;0.05);甲钴胺组Bax表达与同期模型组比较均有不同程度降低,7 d时表达水平最低,与模型组比较差异有统计学意义(Plt;0.05)。结论: 甲钴胺的神经元保护作用与其上调Bcl2蛋白、抑制Bax蛋白的表达有关。 【关键词】 甲钴胺; 神经元; B细胞淋巴瘤/白血病2; Bcl2相关X蛋白; 大鼠 　　[Abstract] Objective: To study the protective mechanism of methycobal on neuron of dorsal root ganglion odel of rats. Methods: SD rats ly divided into normal, model, methycobal group. Preconditioned respectively for 14 days, then the sciatic nerve lesion models ed, the expression of Bcl2 and Bax munohistochemical method 12 h, 24 h, 48 h, 72 h, 5 d, and 7 d after the operation,respectively. Results: After 12 h of the model operation, The expressions of Bcl2 in methycobal group increased obvionsly, peaked at 24 h～48 h, and also the expressions of Bcl2 in methycobal group increased obvionsly 7 d, pared odel group (Plt;0.05). The expressions of Bax in methycobal group odel groups from 12 h after the sciatic nerve lesion, and loodel group(Plt;0.05). Conclusion: Methycobal might upregulate the expressions of Bcl2 and do the neuroprotective effect. 　　[Key ethycobal; neuron; Bcell lymphoma/leukemia2; Bcl2 associated X protein; rat 　　周围神经损伤后可引起相应节段神经元的死亡,严重地影响了周围神经的再生及其功能的恢复,本课题前部分实验已证实了甲钴胺对周围神经损害后神经元有确切的保护作用[1],但其作用机制尚不明确,本实验以甲钴胺预处理后观察动物模型背根神经元Bcl2、Bax的表达,以探讨甲钴胺对坐骨神经损害后神经元保护机制。 　 　1 材料与方法 　　1.1 材料与分组 　　甲钴胺由卫材(苏州)制药有限公司提供(批号:020564),免疫组化试剂盒(即用型非生物素pv6001/6002试剂盒)、DAB显色试剂盒、国产分析纯由北京中杉金桥生物技术有限公司提供。常规神经分离设备一套，SD大鼠72只,SPF级,体质量180～220 g(由无锡市江南实验动物有限公司提供)。禁食12 h,按体质量随机分为正常组、模型组和甲钴胺组,每组24只,雌雄各半。 　　1.2 方 法 　　1.2.1 预处理 正常组不给药;甲钴胺组按人与动物体表面积折算的等效计量比值表计算法予甲钴胺104 μg·kg-1·d-1,腹腔注射,共14 d;模型组按0.8 ml·kg-1·d-1腹腔注射生理盐水,共14 d,常规饲养。 　　1.2.2 大鼠周围神经损害动物模型的建立 参照 文献 [2]方法制作周围神经损害动物模型:大鼠用3%戊巴比妥10 ml/kg麻醉,仰卧固定于鼠板上,于右后肢腹股沟处切开皮肤1 cm,钝性分离肌肉组织,显露坐骨神经,正常组