RNAi沉默survivin基因表达对膀胱癌EJ细胞增殖的影响.PDF

第( 卷第!( 期 第* 三* 军* 医* 大* 学* 学* 报 O49 ( ，,O9 !( * * !) ’ 年A 月 -:-* --1/=‘-/* =/1‘‘,-/* =‘a‘:-+‘3* :/+:‘-/* * 0G49 ’ 论著 文章编号：!#$%% （’ ）!(# !)#% !#$ 沉默!#$%$% 基因表达对膀胱癌% 细胞增殖的影响 杨华安，苟* 欣，郑传东，吴* 跃，何卫阳* * （重庆医科大学附属第一医院泌尿外科，重庆%!) ） * * 摘* 要：目的* 通过+,- 干扰（+,-. ）阻断/0 细胞中!#$%$% 基因的表达，研究!#$%$% 基因沉默后对细胞生长和细 胞凋亡的影响。方法* 将合成的1,- 正义链及反义链变性、退火，形成的双链1,- 与23.456758 9 线性质粒以:% 1,- 连接酶连接，重组质粒经酶切、1,- 测序鉴定后，用脂质体法转染/0 细胞，通过+:#;+、免疫印迹检测干扰效果。=:: 法 检测细胞生长的影响，流式细胞仪检测转染后/0 细胞的凋亡变化 。结果* 酶切及测序证实设计合成的1,- 片段已正确 插入载体。+:#;+ 、免疫印迹检测实验表明：23.456758 9 #3!、23.456758 9 #3 重组载体均能有效地阻断/0 细胞中 !#$%$% 基因的表达，使!#$%$% 基因在?+,- 和蛋白水平上的表达明显下调（’ @ 9 !），后者抑制效果更佳。转染后的/0 细胞生长速度明显变慢。转染23.456758 9 #3 实验组细胞的凋亡增加了!A 9 B 。结论* 重组真核载体能有效抑制/0 细胞的!#$%$% 表达，抑制细胞的增殖，诱导细胞凋亡。 * * 关键词：+,- 干扰；!#$%$% ；膀胱癌细胞 * * 中图法分类号：+A(#() ；+A( 9 ( ；+A($9 C* * * 文献标识码：- %’’()*+ ,’ !#$-+$.(/)(0 !#$%$% 1(/( ,/ 2.300(4 )3/)(4 )(.. .$/(+ % D-,E FGH#H6 ，EIJ K.6 ，LF/,E MGH6#NO6P ，QJ DG5 ，F/ Q5.#RH6P （152H8S?56S OT J8.6H8R 3G8P58R ，:M5 U.8VS -TT.4.HS5N FOV2.SH4 ，MO6PW.6P =5N.7H4 J6.X58V.SR ，MO6PW.6P %!) ，M.6H ） * * #2+*43)* ：!#$%’($* :O 7O6VS8G7S 5GYH8ROS.7 5Z285VV.O6 X57SO8V [R GV.6P SM5 23.456758 9 X57SO8 TO8 .6# M.[.S.6P MG?H6 !#$%$% P565 [R +,- .6S58T585675 ，H6N SO N5S57S SM5 5TT57S OT SM5 V.45675N !#$%$% P565 O6 SM5 P8O\SM H6N H2O2SOV.V OT /0 7544V9 )$*+,-* :\O SH8P5S P565 V5P?56SV \585 VR6SM5V.]5N H6N 74O65N .6SO SM5 23.456758 9 X57SO8 85V257S.X54R SO 7O6VS8G7S S\O 857O?[.6H6S 5GYH8ROS.7 5Z285VV.O6 X57SO8V ：23.456758 9 #3! H6N 23.456758 9 #3 ，[OSM OT \M.7M \585 .N56S.T.5N [R