流式细胞摄像系统应用于藻类检测的初步研究-水生态学杂志-水工程.PDF

第３３卷第２期 水 生 态 学 杂志 　Ｖｏｌ．３３，Ｎｏ．２ ２０１２年　３月 ＪｏｕｒｎａｌｏｆＨｙｄｒｏｅｃｏｌｏｇｙ 　Ｍａｒ．，　２０１２ 流式细胞摄像系统应用于藻类检测的初步研究 张俊芳，沈　强，胡菊香，李　聃 （１．水利部中国科学院水工程生态研究所，水利部水工程生态效应与生态修复重点实验室，武汉　４３００７９） 摘要：流式细胞摄像系统（ＦｌｏｗＣＡＭ）用于藻类形态特征识别与快速定量检测是目前先进和可行的方法之一。通 过ＦｌｏｗＣＡＭ对３种培养藻类（斜生栅藻 Ｓｃｅｎｅｄｅｓｍｕｓｏｂｌｉｑｕｕｓ、蛋白核小球藻 Ｃｈｌｏｒｅｌｌａｐｙｒｅｎｏｉｄｏｓａ和莱茵衣藻 Ｃｈｌａｍｙｄｏｍｏｎａｓｒｅｉｎｈａｒｄｔｉｉ）细胞密度和粒径大小进行检测，并与显微镜人工观察结果进行差异性统计对比。结果 表明，ＦｌｏｗＣＡＭ为藻类分类鉴定提供了良好的图像及数据，可进行种类鉴定的藻类直径不应小于５ ｍ。定量检 μ ５ 测藻类样品的密度不应小于３×１０个／Ｌ，即ＦｌｏｗＣＡＭ适合于藻类密度较高水体、特别是有水华发生水体的藻类 鉴定和定量检测。 关键词：流式细胞摄像系统；藻类检测；粒径大小 中图分类号：Ｑ３３６　　文献标志码：Ａ　　文章编号：１６７４－３０７５（２０１２）０２－００９１－０５ 　　藻类是水生态系统中初级生产者的重要组成部 １　材料和方法 分，其细胞密度和粒径大小是水域初级生产力的重 要指标，水华的发生往往是藻类异常增殖的结果。 １．１　试验材料 对水华藻类密度测量通常采用传统的显微镜人工计 选取本实验室藻种库的斜生栅藻（Ｓｃｅｎｅｄｅｓｍｕｓ 数方法，但当研究涉及时间、空间尺度时，其工作量 ｏｂｌｉｑｕｕｓ）、蛋白核小球藻（Ｃｈｌｏｒｅｌｌａｐｙｒｅｎｏｉｄｏｓａ）和 非常大，显微镜方法在藻类计数速度与准确性方面 莱茵衣藻（Ｃｈｌａｍｙｄｏｍｏｎａｓｒｅｉｎｈａｒｄｔｉｉ）为试验材料。 受到很大限制。 １．２　试验方法 流式细胞摄像系统（ＦｌｏｗＣＡＭ）是近年来发展 先用孔径为５０ ｍ的滤布过滤藻液除去杂质 μ 起来的一种先进的检测仪器，主要用于快速检测海 后，依次将３种藻样稀释成系列梯度（Ａ、Ｂ、Ｃ），然 洋、湖泊、河流等各种水体中的有机和无机悬浮体 后分别在光学显微镜（ＯＬＹＭＰＵＳＢＸ５１）和 Ｆｌｏｗ （包括浮游动物、浮游植物以及其他微粒）（ＳＩＥＲＡＣ ＣＡＭ下进行检测（细胞密度、粒径大小、细胞显微摄 ＫＩｅｔａ１，１９９８；ＦＬＵＩＤＩｍａｇｉｎｇＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２００７）。 影）。３种藻样液体混合进样，进行ＦｌｏｗＣＡＭ分析， ＦｌｏｗＣＡＭ在国外海洋研究中的应用较多，主要用于 并对细胞进行显微摄影。 检测浮游动物和浮游植物（ＪＡＳＯＮｅｔａ１，２００５）、污 ２　结果 水及自然水体中的红潮（Ｋａｒｅｎｉａｂｒｅｖｉｓ）（ＥＤＷＡＲＤ ｅｔａ１，２００６）；在我国只有高华等（２００６）个别学者利 ２．１　ＦｌｏｗＣＡＭ显微摄影 用ＦｌｏｗＣＡＭ检测海洋浮游植物物种并建图谱库； 从ＦｌｏｗＣＡＭ获取的３种藻类混合进样显微摄 ＦｌｏｗＣＡＭ检测淡水藻类是否具有较高的准确性还 影图像（图１ａ）中可以看出，斜生栅藻和莱茵衣藻可 有待确定。本试验通过 ＦｌｏｗＣＡＭ对３种淡水培养 清晰地观察到，而