江苏汉族正常人群NQO1基因常见位点多态性.pdfVIP

江苏汉族正常人群NQO1 基因常见位点多态性 11 1 1 1 2 2 许婧 ，尹立红 ，浦跃朴 ，张文翠 ，王仪 ，潘恩春 1.东南大学公共卫生学院劳动卫生与环境卫生学系，江苏南京 （210009 ） 2. 江苏省淮安市疾病预防控制中心，江苏淮安（223200 ） E-mail ：lhyin@ 摘要：本文应用聚合酶链式反应-限制性片断长度多态性（PCR-RFPL ）、等位基因特异 性引物-聚合酶链反应技术（AS-PCR ）及普通Taqman探针等技术方法，对640例正常体检样 本NQO1基因多位点进行分析。通过研究发现NQO1基因相关位点野生型纯合子、杂合子、突 变纯合子三种基因型的分布频率分别是： rs1800566 44.8% ，36.4% ，18.8%； rs4986998 93.5% ，6.2% ，0.3% ； rs10517 16.1% ，60.1% ， 23.8% ；编码区r和非编码区 rs1050873 ， rs1063556 ， rs8056468 四个位点未检测到杂合子和突变纯合子。本研究结果与 国内外相关报道有一定的差异。对了解不同种族、不同地域人群NQO1基因的遗传特征具有 一定的参考价值。 关键词：汉族人群；NQO1基因；多态性 中图分类号：Q346.5 1. 引言 NQO1 基因位于人16 号染色体q22 区段，长约20kb ，一共由6 个外显子组成，中间被 5 个内含子所隔开[2]，其编码的NAD(P)H ：醌氧化还原酶1 (NAD(P)H: Quinine Oxidoreductase, NQO1 ；DT-硫辛酰胺脱氢酶，DT －diaphorase) [1]是一种黄素酶，酶分子以双聚体形式存在， 每个亚基含有一个黄素腺嘌呤二核苷酸(FAD)分子，相对分子质量为30kb [2] 。该酶催化醌双 电子还原反应，对醌及其衍生物有解毒作用，NQO1 在细胞内主要存在于细胞质，在微粒体、 线粒体、高尔基体中也可以检测到该酶的活性。能够借助NADH或NADPH作为电子供体， 催化体内醌类化合物的还原反应[3] 。醌在自然界中广泛存在，能诱发哺乳动物细胞癌变、突 变和坏死。经过NQO1 代谢后，醌类直接被还原成氢醌，在胞内被稳定结合和排泄，避免生 成不稳定的半醌类物质。因而NQO1 的还原性能够保护细胞不被自然界中的醌类等生物异源 性物质所损伤。相关研究结果表明，NQO1 基因突变可导致酶活性降低，增加肿瘤发生的危 险性。但是相关多态位点的变化还没有系统的研究。 本文应用聚合酶链式反应-限制性片断长度多态性( PCR-RFLP) 技术、等位基因特异性 本课题得到国家自然科学基金资助项目）；江苏预防医学科研基金资助项目（Y200425 ）； 东南大学国家自然科学基金预研项目（XJ0525212 ）资助。 - 1 - 引物-聚合酶链反应技术（AS-PCR ）及普通Taqman探针技术，分析了江苏淮安汉族人群NQO1 基因编码区rs1800566 ，rs4986998 ，r和非编码区rs1063556 、rs1050873 、rs10517 、 rs8056468 等7 个位点多态性的分布特征。 2. 材料及方法 2.1 研究人群 收集正常体检样本658例，均为居住淮安多年的汉族人。每一样本取全血5ml，EDTA 抗凝。 2.2 DNA提取 取5ml EDTA抗凝剂全血于10ml玻璃管中，加入3ml