高速逆流色谱技术分离决明子中蒽醌类化合物-江苏农业科学.PDF

江苏农业科学　２０１６年第４４卷第６期 — ３８１— 吴秋霞，孙卫红，王　晓．高速逆流色谱技术分离决明子中蒽醌类化合物［Ｊ］．江苏农业科学，２０１６，４４（６）：３８１－３８５． ｄｏｉ：１０．１５８８９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００２－１３０２．２０１６．０６．１１２ 高速逆流色谱技术分离决明子中蒽醌类化合物 １，２ １ ２ 吴秋霞 ，孙卫红 ，王　晓 （１．江苏大学食品与生物工程学院，江苏镇江２１２０１３；２．山东省科学院／山东省分析测试中心，山东济南２５００１４） 　　摘要：采用高速逆流色谱（ＨＳＣＣＣ）技术分离制备决明子粗提物中的蒽醌类化合物。首先用石油醚－乙酸乙酯－ 甲醇－水（体积比３∶２∶３∶２）的溶剂体系，进一步分离，从决明子粗提物中得到５种化合物 、 、 、 、 和混合 Ⅰ Ⅲ Ⅴ Ⅵ Ⅶ 组分Ａ（含有化合物 和 ）。将组分Ａ用石油醚－乙酸乙酯－甲醇－水（体积比３∶７∶５∶５）的溶剂体系进行进一 Ⅱ Ⅳ 步分离，得到２种化合物 和 。经 ＨＰＬＣ检测，化合物 ～ 的纯度分别为９９．７％、９６．４％、９１．０％、９５．３％、９８． Ⅱ Ⅳ Ⅰ Ⅶ ７％、９７．９％、９５．８％。根据ＥＳＩ－ＭＳ和１ＨＮＭＲ所提供的数据，化合物 ～ 分别鉴定为橙黄决明素、ａｌａｔｅｒｎｉｎ、１－甲 Ⅰ Ⅶ 氧基－２－羟基大黄素、黄决明素、１－Ｏ－甲基大黄素、决明素、大黄素。表明高速逆流色谱分离技术是一种快速有效 的分离蒽醌类化合物的方法。 　　关键词：高速逆流色谱；决明子；蒽醌类化合物 　　中图分类号：Ｒ２８４．２　　文献标志码：Ａ　　文章编号：１００２－１３０２（２０１６）０６－０３８１－０４ 　　决明子是豆科植物决明（ＣａｓｓｉａｏｂｔｕｓｉｆｏｌｉａＬ．）或小决明 ［１］ １　材料与方法 （ＣａｓｓｉａｔｏｒａＬ．）的干燥成熟种子 ，具有清肝明目、润肠通 便、调压降脂、增强免疫力、抗氧化和抗衰老等作用［２－４］，是一 １．１　原料与试剂 种药食同源的中草药植物。研究表明，决明子中的主要有效 决明子，购自济南市中鲁医院；用于制备决明子粗提物用 成分是蒽醌及其苷类，例如橙黄决明素、黄决明素、决明素、美 的乙醇为工业乙醇，萃取和逆流色谱分离用的试剂如石油醚、 决明子素和大黄素等。橙黄决明素是决明子中的一个重要蒽 乙酸乙酯、氢氧化钠、甲醇等均为分析纯；高效液相色谱用甲 醌成分，对低密度脂蛋白受体基因转录水平有增强作用，能显 醇为色谱纯，美国天地公司生产；水为娃哈哈纯净水。 著降低高脂血症大鼠的胆固醇、甘油三脂和低密度脂蛋白胆 １．２　主要仪器与设备 ［５］ 固醇 ，也是决明子中控制患者血脂水平的主要有效成 ＴＢＰ３００Ａ型高速逆流色谱仪，包括多层聚四氟乙烯螺旋 ［６］ 分 ；决明子中的另一个蒽醌成分大黄素，具有保护肝细胞 管（直径２．３ｍｍ，分离体积３００ｍＬ， 值为０．５～０．８），上海 β 和胆管细胞、抗癌、消炎、抗血管生成和抑制蛋白质糖化及醛 同田生物技术有限公司生产；ＴＢＰ５００２泵、８８２３Ｂ－紫外检测 ［７－９］ 糖合成酶的作用 。基于以上药理作用，建立一种快速有 器，北京宾达英创科技有限公司生产；３０５７－１１记录仪，重庆 效分离纯化决明子中蒽醌类化合物的方法非常必要，对