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植物位点特异性甲基化研究的引物设计及PCR体系优化
圆园16 35 9 :1686-1693 20 16 9
， （） 农 业 环 境 科 学 学 报 年 月
允燥怎则灶葬造 燥枣 粤早则燥鄄耘灶增蚤则燥灶皂藻灶贼 杂糟蚤藻灶糟藻
. PCR [J]. , 2016, 35 9 1686-1693.
王鹤潼，宋 婕，崔伟娜，等 植物位点特异性甲基化研究的引物设计及 体系优化 农业环境科学学报 （）
WANG He-tong, SONG Jie, CUI Wei-na, et al. Primer design and PCR condition optimization for plant site-specific methylation[J]. 燥怎则灶葬造 燥枣 粤早则燥-耘灶增蚤则燥灶原
皂藻灶贼 杂糟蚤藻灶糟藻, 20 16, 35 9 1686-1693.
（）
植物位点特异性甲基化研究的引物设计及PCR 体系优化
1，2 3 4 5，6 3 1 1 1
王鹤潼 ， 婕 ，崔伟娜 ，曹 霞 ，何 蕾 ，贾春云 ，惠秀娟 ，台培东 ，
1 1*
成智博 ，刘 宛
1. 1100 16 2. 110 163 3.
（中国科学院沈阳应用生态研究 污染生态与环境工程重点实验室，沈阳 ； 辽宁何氏医学院，沈阳 ； 辽宁大
110036 4. 201418 5. 110866 6.
学，沈阳 ； 上海应用技术学院，上海 ； 沈阳农业大学，沈阳 ； 通辽市农业科学研究院蔬菜 ，内蒙古
通辽 028000 ）
要 通过设计大量引物，探索在植物甲基化引物设计中长、短引物的设计方法及其相应的PCR 条件，同时比较不同Taq 酶对甲
17~30 bp Touch-down PCR 31~50 bp 55 益
基化率影响。结果表明 短引物适合使用 程序 ，但特异性差、成功率低； 长引物使用 退火
60 益延伸的PCR 条件成功率最高，其中反向引物的长度及Tm 小于正向引物较佳；高保真酶因其3忆寅5忆外切酶活性不宜用于甲基
化研究，而EpiTaqTM HS 在PCR 结果中表现最佳。
Taq PCR
关键词 植物甲基化；引物设计； 酶； 条件
Q943.2 A 1672-2043 2016 09-1686-08 doi:10.11654/jaes.2016-0173
中图分类号：
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