抗ENA六项抗体诊断试剂盒酶免斑点法说明书-北京和杰创新生物.DOC

抗核周因子（APF）检测试剂盒（） 说 明 书 【产品名称】 中文名称：检测试剂盒（） 英文名称：Detection Kit forAnti-perinuclear Factor（Indirect Immunofluorescence） 【包装规格】0人份/盒 【预期用途】 北京和杰创新生物医学科技有限公司生产的检测试剂盒（）， 【检测原理】 APF的检测采用间接免疫荧光法（Indirect Immunofluorescence，IIF），抗原来自正常人脱落的颊粘膜上皮细胞，在与病人待检血清反应后，加入荧光素（FITC）标记的兔抗人IgG抗体，最终于显微镜下作形态学的定性判断。 【主要组成成分】序号 组成 剂型 规格 数量 1 APF抗原片 固体 人份/张 10张 2 APF荧光二抗 液体 mL/支 1支 3 APF阳性对照 液体 0.3mL/支 1支 4 APF阴性对照 液体 0.3mL/支 1支 5 APF封片剂 液体 4mL /支 1支 6 盖玻片 固体 15片/ 1盒 7 PBS粉剂 固体 12.2/袋 2袋 液体 mL/支 9 使用说明书 固体 1份 1份 正常人脱落的颊粘膜上皮细胞FITC标记的兔抗人IgG 【储存条件及有效期】 2-8℃避光保存-20℃保存），有效期个月 【样本要求】 人血清或血浆，要求清亮、无沉淀、无黄疸； 样本1周以内检测可在4℃条件下贮存； 样本1周以上检测需在-20℃条件下冻存，且避免反复冻融。 【检验方法】 准备：取出抗原片，待其恢复至室温后剪开包装。将洗涤用的PBS粉剂用蒸馏水溶解至1L，混匀后作洗涤和标本稀释用。 稀释：待测血清用洗涤液作1:稀释。 加样：在倒扣板的反应孔内分别加入稀释好的血清和阴阳性对照25μl/孔注意：加样时避免产生气泡。 孵育：将抗原片盖在倒扣板对应的凹槽里，室温孵育30min。注意：确保每个标本均能够与抗原基质相接触，而标本之间不相互接触。 洗涤：取出抗原片，用洗涤液轻轻从一侧将反应液冲洗掉，浸泡至洗片缸内，静置5 min后， 加样：在倒扣板的反应孔内加入荧光二抗，25μl/孔。注意：加样时避免产生气泡。 孵育：用纸擦去抗原片周边和反面多余液体后，将抗原片盖在倒扣板对应的凹槽里，室温孵育30min。注意：确保每个标本均能够与抗原基质相接触，而标本之间不相互接触。 洗涤：重复步骤5。 封片：在盖玻片上滴加。用纸擦干周边和反面多余液体后，将载片的朝下置于准备好的盖玻片上，。结果观察：荧光显微镜下观察结果。【参考值（参考范围）】【检验结果的解释】 在荧光显微镜下观察，颊粘膜细胞细胞核呈现橘红色，APF阴性细胞胞浆均匀清亮无荧光颗粒；APF阳性细胞细胞核周围出现圆形、均质的绿色荧光颗粒，阳性细胞与颗粒的大小和多少无关。 观察同一反应孔，大于5个APF阳性细胞判为APF抗体阳性，5个以下为可疑，少于2个为阴性。【检验方法的局限性】 该试剂盒只提供的检测结果，具体病情及诊断应由临床医生结合临床表现和其他信息综合判断。【产品性能指标】 ：从室内阳性质控品P1-P10（共计10份阳性血清标本）中随机抽取3 支用试剂盒进行检测，其检测结果均为阳性。 ：从室内阴性质控品N1-N15（共计15份阴性血清标本）中随机抽取3 支用试剂盒进行检测，其检测结果均为阴性。 批内：用试剂盒测定份室内阳性质控品，重复检测，其用3个批号的试剂盒测定1份室内阳性质控品，重复检测，其。 【注意事项】建议在200倍镜下观察结果，由上至下、由左至右观察整个反应孔。注意区分细胞内形态不规则的非均质荧光颗粒。冲洗抗原片时，动作要轻柔，防止抗原细胞脱落。封片避免与皮肤发生接触。对照血清经检测HBsAg、抗HCV抗体、抗HIV抗体均为阴性，但试剂盒的所有组分都应视作潜在传染源小心处理。参考文献Nienhuis, R. L.,Mandema, E. A New Serum Factor in Patients with Rheumatoid Arthritis; the Antiperinuclear Factor. Ann Rheum Dis.1964.23:302-305 Marmont, A. M.,Damasio, E. E.,Bertorello, C.et.al. Studies on the antiperinuclear factor. Arthritis Rheum.1967.10(2):117-128 Nienhuis, R. L. Evaluation of the antiperinuclear factor (APF). Ned Tijdschr Geneeskd. 1973.117(42):1561-156