植物荧光原位杂交技术的发展及其在植物基因组分析中-植物科学学报.PDF

武汉植物学研究 2006，24(4)：365—376 Journalof Wuhan BotanicalResearch 植物荧光原位杂交技术的发展及其 在植物基 因组分析中的应用 佘朝文 ，宋运淳 (1．怀化学院生物系，湖南怀化 418008；2．武汉大学生命科学学院，植物发育生物学教育部重点实验室，武汉 430072) 摘 要：荧光原位杂交(HSH)是在染色体、间期核和DNA纤维上定位特定DNA序列的一种有效而精确的分子细 胞遗传学方法。20年来，植物荧光原位杂交技术发展迅速：以增加检测的靶位数为 目的，发展了双色 FISH、多色 FISH和多探针 FISH鸡尾酒技术 ；为增加很小染色体 目标 的检测灵敏度，发展了BAC—FISH和酪胺信号放大 FISH (TSA．FISH)等技术；以提高相邻杂交信号的空间分辨力为主要 目的，发展 了高分辨的粗线期染色体 FISH、间期核 FISH、DNA纤维 FISH和超伸展的流式分拣植物染色体FISH技术。在植物基因组分析中，FISH技术发挥了不可替 代的重要作用 ，它可用于：物理定位DNA序列，并为染色体的识别提供有效的标记；对相同DNA序列进行比较物理 定位 ，探讨植物基因组的进化；构建植物基因组的物理图谱 ；揭示特定染色体区域的DNA分子组织；分析间期核中 染色质的组织和细胞周期中染色体的动态变化 ；鉴定植物转基因。 关键词 ：荧光原位杂交；分子细胞遗传学；植物染色体；植物基因组 ；物理作图 中图分类号：Q94-33 文献标识码 ：A 文章编号：1000．470X(2006)04．0365—12 ProgressofPlantFISH TechniqueandItsApplicationsin theAnalysisofPlantGenome SHE Chao—Wen一．SONG Yun—Chun (1．DepartmentofBiology，HuaihuaCollege，Huaihua，Hunan 418008，China；2．KeyLaboratoryofMOEforPlant DeveolpmentalBiology，Colelgeof Sciences，WuhanUniver．ity，Wuhan430072，China) Abstract：Fluorescenceinsituhybridization (FISH)isaneffectiveandaccuratemolecularcytogenetic toolformappingspecificDNA sequencesonchromosomes，interphasenucleiandDNA fibers．Rapidad- vancesinplantFISH techniquehavebeenmadeinthepasttwodecades．DualFISH，multicolorFISH andmultiprobeFISH cocktailhavebeendevelopedtoincreasethenumberofdetectedtargets；BAC—FISH andtyramidesignalamplificationFISH (TSA—FISH)havebeenappliedtoincreasehtedetectionsensiti— vityofvery smallchromoosmaltargets；and high resolution FISH such aspachyteneFISH，interphase FISH ，fiberFISH andFISH onsuper—stretchedflow—osrtedplantchromoosmehavebeendevelopedmainly toimprovethespatialresolutionofsignalsderivedfrom flankingsequences．FISH haveplayedimportant roles