洋桔梗叶片再生体系的建立-上海师范大学学报.PDF

( ) 第3 3 卷第 1 期 　　　　　　　　　　　　　　　上海师范大学学报 自然科学版 Vol . 33 ,No . 1 2 0 0 4 年 3 月　　　　　　 　　　　　Journal of Shanghai Normal University (Natural Sciences) 2 0 0 4 , Mar . 洋桔梗叶片再生体系的建立 毛元荣 ,刘茜 ,周根余 (上海师范大学 生命与环境科学学院 , 上海 200234) 摘 　要 : 利用正交等实验 ,对洋桔梗叶片再生体系进行了系统的研究 ,确定了洋桔梗叶片不定 芽诱导培养基最佳激素配比为 MS + ZT 0. 5mg/ L + NAA0. 01mg/ L ,p H 值为 6. 3 ,光照强度 - 2 - 1 60μ ·s . 不定芽诱导生根最佳培养基及激素配比为 1/ 2MS + IBA 1 mg/ L . 该实验结 mol ·m 果为通过叶盘法开展农杆菌介导的洋桔梗遗传转化奠定了良好的基础. 关键词 : 洋桔梗 ; 叶盘法;再生体系 ( ) Q943. 1 　　 A 　　 2004 中图分类号: 文献标识码 : 文章编号 : 0 　引　言 ( ) 洋桔梗 E us tom a r ussel l ian u m 又称大花龙胆 ,为龙胆科、龙胆属观赏植物 ,原产北美洲 ,是近年来 国际上逐渐流行的一种高档切花. 洋桔梗花冠呈美丽的杯状 ,颜色有白色、粉红色、橘红色、紫色、蓝色以 及双色等 ,并有单瓣和重瓣两大类 ,花姿高雅秀丽 ,插花效果很好. 花朵寿命可达 2 ～3 周 ,除做切花外 , 还可以做盆栽或花坛植物栽培[1 ] ,具有很大的市场前景. 此外采用叶盘法开展基因转化研究也需要建 立高效成熟的叶片再生体系[2 ] . 在洋桔梗的组织培养中 ,前人做了大量的工作 ,建立茎尖、茎段等器官 的再生系统 ,但对叶片再生系统研究较少 ,且再生频率低、各个品种间的差异大[3 ,4 ] . 本实验利用正交实 验设计 ,系统地进行了叶片再生系统建立的研究 ,为洋桔梗无性快繁的工厂化生产扩大了繁殖材料 ,可 以满足市场对洋桔梗种苗的需求, 同时也为开展农杆菌介导的基因转化奠定了良好的基础. 1 　材料和方法 1. 1 　材 　料 ( ) 实验材料为洋桔梗 E us tom a r ussel l ian u m 品种Deep Blue 种子萌发获得无菌苗 ,经继代增殖后 , 切取单芽转入无任何激素的 MS 培养基中壮苗 , 以消除原来培养基中激素后效应的影响. 当芽长到4～6 叶片时 ,切取从顶芽算起的第 2 ,3 对叶片作为实验材料. 　　　　　　　　　　 收稿日期 : ( ) 基金项目 : 上海市高校科技发展基金 03DZ02 . ( ) ( ) 作者简介 : 毛元荣 1976 ,男 ,上海师范大学生命与环境科学学院硕士研究生 ;周根余 1946 ,男 ,上海师范大学生 命与环境科学学院教授. 　第 1 期