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2017-09-02 发布于江苏
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重组人心肌肌钙蛋白I基因工程菌的构建与表达

第 29 卷第 2 期天津科技大学学报 Vol. 29 No. 2 2014 年 4 月 Journal of Tianjin University of Science Technology Apr. 2014 DOI:10.13364/j.issn.1672-6510.2014.02.004, 重组人心肌肌钙蛋白 I 基因工程菌的构建与表达 1 1 2 丁祥瑞，汪建明，蔡胜和 (1. 天津科技大学食品工程与生物技术学院，天津 300457 ；2. 天津石桥生物科技有限责任公司，天津 300457) 摘要：人心肌肌钙蛋白 I (hcTnI)是临床检测心肌损伤及预后提供诊断的生物学指标，由于来源有限，采用基因重组技术，以期获得高表达量的人心肌肌钙蛋白 I．人工合成 hcTnI 基因，将其插入 pET-11a 载体中，通过酶切鉴定正确后转入表达宿主菌 BL21 (DE3) 中，诱导表达目的蛋白．采用蛋白免疫印迹反应 (Western Blot ，WB)鉴定表达目的蛋白的 4 免疫特异性．经 SDS证实重组蛋白的相对分子质量约为 2.6 ×10 ，凝胶密度扫描软件检测到目的蛋白占总蛋白比例为 30.1% ，WB 实验验证诱导后目的蛋白特异性良好．成功构建了重组 hcTnI 基因在大肠杆菌表达的工程菌株，并获得表达，为制备高特异性的抗体及临床检测应用和测定标准化奠定了基础．关键词：重组人心肌肌钙蛋白 I ；基因重组；诱导表达中图分类号：Q789 文献标志码：A 文章编号：1672-6510 (2014)02-0016-04 Construction and Expression of the Genetic Engineered Bacteria of Recombined Human Myocardial Rroponin I 1 1 2 DING Xiangrui ，WANG Jianming ，CAI Shenghe (1. College of Food Engineering and Biotechnology，Tianjin University of Science Technology ，Tianjin 300457 ，China ； 2. Tianjin Shiqiao Biological Technology Limited Liab