第13章基因治疗(lsq).pptVIP

第七节 基因治疗 综合免疫缺失症患儿 二、基因治疗的必要条件 基因治疗的基本方法 核酶技术 三股螺旋使之失活 有缺陷的逆转录病毒 （三）靶细胞的选择 受体细胞(靶细胞)的种类 其它受体细胞(靶细胞)的种类 （四）基因转移 1. 非病毒介导的基因转移 2. 病毒介导的基因转移 逆转录病毒载体的特点 安全性问题 (五) 外源基因表达的筛检 标记基因技术 G418筛选原理 筛选过程 四、基因治疗的应用与展望 实现基因治疗面临的困难 基因治疗的前景 反向杂交(芯片技术) 连锁分析的技术原理 (六) 回输体内(细胞介导的基因治疗) 将治疗性基因修饰的细胞(基因工程化细胞)，扩增后以不同的方式回输体内以发挥治疗效果。 优点：易于操作，扩增的是人体自身的细 胞，比较安全。 缺点：细胞在体外的操作时间长，易于污 染，不易形成规模化生产。 基因治疗的构想阶段(1953~) 基因治疗的实验阶段(1980~) 基因治疗的临床应用阶段(1989.1.19~) 遗传性疾病、心血管疾病、肿瘤、感染性疾病、神经系统疾病等。 国内1991.12.31开始血友病的基因治疗 基因缺陷病的早期诊断还很困难 基因载体本身以及外源性基因整合到宿主细胞染色 体的位点多是随机的 导入的基因在宿主细胞内的表达水平难于控制，表 达也有一定的随机性 对于种类更多的、病人数量更大和遗传易感性疾病 其基因治疗的难度更大 前景光明 任重而道远 21世纪的人类基因治疗，就像20世纪的免疫预防和 抗生素的应用，将给人类的健康事业带来极其深刻 的影响 进一步寻找切实有效的基因； 精密调控外源基因在人体内的表达；体细胞移植和重建的生物学研究； 减少外源基因对机体的不利影响。 再见 1.癌基因 2.抑癌基因 3.分子杂交 4.基因诊断 5.基因治疗 6.限制性片段长度多态性 1.简述癌基因家族及其表达产物的功能。 2.简述癌基因的激活机制。 3.简述P53基因的功能。 4.在分子杂交中，探针需具备哪些条件？有哪些标记方法？ 5.简述PCR中引物的设计原则。 6.简述PCR的基本过程。 7.简述Sourther印记杂交的基本过程。 8.简述点突变的诊断方法。 9.简述基因治疗的基本程序。 10.简述病毒介导的基因转移过程。 针对多种点突变或多样本检测设计多个探针、标记样本 探针 A T A C G T A T A G A T A C T G Gene Therapy 第十三章 基 因 治 疗 基因治疗 遗传病的根治应该是基因治疗，但是 基因治疗的难度很高。 1990年第一例基因治疗临床试验使腺苷酸脱氨酶(ADA)基因进入病人自己骨髓细胞，再送回病人体内，治疗严重综合免疫缺失症(SCID，先天性免疫缺陷综合征，基因错译或大片段缺失，引起核苷酸代谢紊乱， 淋巴细胞功能下降，死亡)获得初步效果。 严重综合免疫缺失症（SCID）患儿从出生时起就必须生活在隔离室中。 一、基因治疗的概念 早期,是指用正常的基因原位置换有缺陷的基因对单基因遗传病的一种治疗方法。 目前,广义上来讲是指将遗传物质转移到患者细胞内，使其在体内发挥作用，以达到治疗疾病目的的方法。也可采用适当技术抑制某些基因的异常表达。 直接体内基因治疗：将目的基因在体内直接转移到靶细 胞内，纠正突变基因。（较为理想，但未实现） 间接体内基因治疗：将目的基因转移到体外培养的靶细 胞，使其高效表达,再将靶细胞输回体内。 外源基因可有效导入靶细胞 外源基因能在靶细胞中长期稳定存留 导入基因能适量表达 导入基因的方法及载体对宿主细胞安全无害 1. 发病机制在DNA水平上已经清楚 2. 要转移的基因已经克隆分离，对其表达产物有 详尽的了解 3. 该基因正常表达的组织可在体外进行遗传操作 以上两种方法,就是早期的或经典的基因治疗，是理想的治疗方法，不涉及任何基因组的改变，但技术还达不到。 1. 基因矫正(gene correction)： 纠正致病基因的突变碱基顺序，而将正常部分予以保留。 2. 基因置换(gene replacement)： 将致病基因整个地以正常基因置换(通过同源重组)， 使致病基因永久性得到更正。 3. 基因增补(gene augmentation): 将目的基因导入病变细胞或其他细胞以目的基因的表 达产物来补偿缺陷细胞的功能或使原来的功能得到加强。 4. 基因失活(gene inactivation)