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异淀粉酶应用 异淀粉酶在饲料工业中的应用价值 （1 中国农业大学水利和土木工程学院；2 生物能源持续开发利用教育部工程研究中心； 3 云南师范大学酶工程重点实验室；4 云南师范大学生命科学学院； 5 云南大学生命科学学院省工业微生物发酵工程重点实验室） 在动物体内，营养物质的消化与吸收过程中，酶起着非常重要的促进作用。一般情况下，动物自身能分泌消化酶——蛋白酶、脂肪酶与淀粉酶等，进入消化道，对其摄入的蛋白、脂肪与淀粉等营养物质进行降解，成为能被吸收的小分子，如：氨基酸、脂肪酸、甘油与葡萄糖等。饲料中不仅有营养物，还有大量的结构性多糖，如：果胶、纤维素、甘露聚糖、木聚糖及抗营养物植酸等，而动物（尤其是反刍动物）自身不能产生或分泌降解这些结构性多糖及抗营养物的酶（果胶酶、纤维素酶、甘露聚糖酶、木聚糖酶与植酸酶），因而为了降解这些结构性抗营养物，显著提高饲料的利用率，添加于饲料中的酶，一般是消化酶（蛋白酶、脂肪酶与淀粉酶）与非消化酶制成的复合酶制剂。 饲用酶制剂的研究和应用已有十多年的历史，大量研究表明：饲用酶制剂是一种高效、无毒且无残留的绿色饲料添加剂。饲用酶制剂中非消化酶与消化酶的添加，都能不同程度地降低食糜黏稠度，促进营养物质的消化与吸收，提高饲料利用率。非消化酶的添加可破坏植物细胞壁，降低食糜黏稠度，消除饲料抗营养物的有害作用；消化酶的添加可补充内源消化酶的不足，促进消化机能的改善和养分的吸收利用，提高饲料的生物转化率，促进畜禽的生长发育和生产性能，降低养殖成本，减少粪便中有机物及磷与氮的排放量，减轻畜禽养殖对环境的污染。另外，由于无毒、无残留与不产生抗药性，饲用酶制剂还可作为抗生素添加剂的替代品，添加溶菌酶可杀灭畜禽及水产品体内的某些病原体，防止一些疾病的发生，提高畜禽及水产养殖的整体效益。 谷物（如玉米、高粱、麦类与豆类）中的淀粉是畜禽饲料中糖类的主要来源，淀粉是由葡萄糖单体通过α-1，4-葡萄糖苷键聚合形成的直链淀粉与在α-1，6位有分支的支链淀粉组成的混合物。饲料中的淀粉只有被水解成为葡萄糖单体，才能被动物消化道有效吸收。因而，饲用酶制剂中，作为外源性辅助消化酶，淀粉酶的使用占有重要地位。按照水解淀粉方式的不同，主要的淀粉酶分为4大类型：α-淀粉酶、糖化酶、β-淀粉酶与淀粉解支酶。目前，饲用酶制剂中常用的淀粉酶有α-淀粉酶、糖化酶（葡萄糖淀粉酶）与β-淀粉酶。 α-淀粉酶是内切型糖苷酶，它以随机的方式水解葡聚糖非链端处的内部α-1，4-糖苷键，产生各种类型的寡糖，可使底物黏度迅速降低，不能水解α-1，6-糖苷键，但能跨越；糖化酶属于外切型糖苷酶，可从非还原末端催化α-1，4-糖苷键与α-1，6-糖苷键水解断裂，逐个切下葡萄糖单元，产生葡萄糖，但后者的水解速率极慢；β-淀粉酶，属于外切型糖苷酶，从非还原末端的外侧每隔2个葡萄糖单位水解α-1，4-糖苷键，产生相对低分子质量并带有β-D构型的单一类型产物，作用于支链淀粉产生极限糊精，不能越过α-1，6分支点去进攻另一侧的α-1，4-糖苷键，主要产物为麦芽糖及β-极限糊精。 饲料工业用淀粉质原料大部分含有70％～80％的支链淀粉，支链淀粉是由α-1，4-葡萄糖链通过α-1，6-糖苷键产生侧枝而形成高度分支的多糖，由于每隔20～25个葡萄糖单位就有一个支链点，支链淀粉含4％～5％的α-1，6-糖苷键。因为糖化酶对淀粉中的α-1，6-糖苷键作用力较弱，即使α-淀粉酶和糖化酶联合使用对淀粉的最高转化率DE值为96％，支链淀粉不被分解则影响饲料中淀粉的彻底利用。因而，饲用酶制剂中添加专一水解α-1，6-键的异淀粉酶，可极大提高淀粉的水解速度及最终水解度。理论上可使淀粉彻底水解。 1异淀粉酶的来源 异淀粉酶是淀粉酶家族的重要成员，属于解支酶的一种。自然界中，异淀粉酶来源广泛。目前已在许多植物（如大米、蚕豆、马铃薯、麦芽与甜玉米）中发现有异淀粉酶（R-酶）。高等动物的肝与肌肉中亦有类似于异淀粉酶的分解α-1，6糖苷键的酶存在。微生物是工业用异淀粉酶的主要来源。微生物中能产生异淀粉酶的菌种很多，最初由日本学者从酵母细胞提取液中发现，后续的研究者发现，有不少细菌与某些放线菌均能产生异淀粉酶。但能满足工业化生产的菌种还比较难得。 酶制剂中的异淀粉酶主要由微生物发酵制造。国内外常用的微生物有产气气杆菌ATCC9621、产气气杆菌10016菌株、假单胞菌、链霉与酵母等。目前，世界上只有丹麦的Novo公司具备异淀粉酶的工业化生产能力，我国工业所用异淀粉酶全部从Novo公司进口，价格相当昂贵，极大限制了异淀粉酶在我国的应用。因此，如何降低酶成本，寻找一条国产化生产异淀粉酶的途径，成为酶制剂行业努力的方向。 国内虽然从1973年就开始解支酶的研究工作，但一直局限于微生物（典型菌株产气气杆菌来源的普鲁兰