温阳活血中药复方对冠心病阳虚血瘀证大鼠血小板GPⅡb-Ⅲa影响.doc

温阳活血中药复方对冠心病阳虚血瘀证大鼠血小板GPⅡb-Ⅲa影响摘要：目的：研究温阳活血中药复方对冠心病阴虚血瘀证大鼠血小板GPⅡb-Ⅲa的影响。方法：建立冠心病阴虚血瘀证大鼠模型；同时观察温阳活血中药复方对冠心病阴虚血瘀证大鼠血小板GPⅡb-Ⅲa的影响。结果：温阳活血中药复方治疗组与模型组比较，能够显著降低血小板膜糖蛋白Ⅱh／Ⅲa(GPⅡh／Ⅲa)分子数，与对照组比较效果尤佳且有明显的量效关系。结论：温阳活血中药复方能够降低GPⅡb／Ⅲa受体的含量，阻断“外一内”信号转导途径，减少GPⅡh／Ⅲ8与Fg的结合量，达到抑制血小板聚集的作用。 关键词：冠心痛阴虚血瘀证；温阳活血中药复方；GPⅡb一Ⅲa 中图分类号：R285.5　文献标识码：A　文章编号：1673-7717(2008)11-2270－02 血小板功能异常及形态变化在冠心病、心肌缺血、动脉粥样硬化的发生、进展、转归中具有重要作用。血小板膜糖蛋白是血小板膜蛋白的主要成分。近年研究发现血小板膜表面的糖蛋白Ⅱb／Ⅲa复合物在黏附聚集等功能中起关键作用。血小板的膜糖蛋白Ⅱb和Ⅲa结合成的Ⅱh／Ⅲa(GPⅡb－Ⅲa)受体，是血小板活化的最终效应受体，并且GPⅡb－Ⅲa与纤维蛋白原的结合是血小板聚集的最后通路。本研究旨在成功建立冠心病阳虚血瘀证大鼠模型基础上，通过检测各组大鼠血小板GPⅡb－Ⅲa含量的差异，探讨温阳活血中药复方调控冠心病阳虚血瘀证大鼠血小板内GPⅡb－Ⅲa受体作用机理，并为其推广应用于临床提供科学的理论和实验依据。 1 材料与方法 1.1　实验动物选清洁级Wistar雄性大鼠60只，体重200～250g。由辽宁中医药大学动物实验中心提供。 1.2　动物分组60只大鼠随机分为正常组、模型组、西药(阿斯匹林)对照组、中成药(复方丹参片)对照组、中药治疗低剂量组、中药治疗高剂量组，每组10只，单笼喂养。 1.3　药物组成与制备 由黄芪、桂枝、丹参、郁金等中药。按处方比例称取中药材，并按胶囊制备工艺以75％乙醇提取回收两次，调整浓度为1:2，相当于悬液含生药量2g／mL。 1.4　实验用药造模及取 材正常组大鼠每天饲喂基础饲料加生理盐水灌胃10nR／kg体重，其余各组饲喂高脂饲料，模型组大鼠生理盐水灌胃10mL／kg体重，西药(阿斯匹-林)对照组大鼠灌胃阿斯匹林悬液25mg／kg体重，中成药(复方丹参片)对照组灌胃复方丹参悬液0.75g／kg体重，中药治疗低剂量组灌胃中药复方悬液10g／kg体重(含生药量)，中药治疗高剂量组灌胃中药复方悬液20g／kg体重(含生药量)，连续灌服6周。除正常组大鼠外，各组大鼠每日冷藏于-2～-4℃冰柜中，持续6周。在第35天，除正常组以外的5组动物皮下多点注射pit(脑垂体后叶素10U／kg体重)，正常对照组给予等容量的生理盐水。24h后，对大鼠进行心电图检测，随后彩色多谱勒检测大鼠心功能。于第43天早晨对各组大鼠进行称体重，颈主动脉采血检测心肌酶、血脂及血小板各项指标。采血之后处死大鼠，摘取心、肝、肺脏，生理盐水冲洗，吸纸吸干后，天平称重，固定于4％多聚甲醛溶液中。 1.5　生化检查 心肌酶、血脂试剂盒采用北京柏定生物工程有限公司产品，奥地利安图斯anthos2010型酶标仪进行检测。血小板膜糖蛋白Ⅱb／Ⅲa试剂盒由苏州大学血栓与止血研究所提供，奥地利安图斯anthos2010型酶标仪进行检测。美国HEMAVET950全自动五分类多物种血液分析仪检测血小板聚集率。 1.6　统计学处理 应用SPSS13.0统计分析软件进行统计学分析。最后结果以均数±标准差(x±s)表示，组间比较用t检验。 2 结果 冠心病阳虚血瘀证模型组大鼠心肌损伤和心功减退程度严重高于正常组，其中血脂、心肌酶升高，左心舒张功能下降，心电图心肌缺血，心肝肺出现心衰、附壁血栓的组织形态学变化，背温下降等特异性改变，基本符合冠心病阳虚血瘀证临床特点。 温阳活血中药复方对冠心病阳虚血瘀证大鼠模型血小板GPⅡh／Ⅲa含量的影响。结果见表1。由表中结果可知，模型组GPⅡh／Ⅲa含量比正常组显著升高(P0.001)。各用药组与模型组比较均有统计学差异。中药高剂量组效果尤其明显。其中Ⅱb分子数统计结果显示，中药高剂量组与中成药、西药比较均有统计学差异。Ⅲa分子数统计结果显示，中药高剂量组与中成药比较有统计学差异。说明温阳活血中药复方可降低冠心病阳虚血瘀证大鼠模型血小板GPⅡh／Ⅲa的含量，中药高剂量组效果尤佳且有明显的量效关系，尤于阿斯匹林和复方丹参片组，且有明显的量效关系。 3 讨论 血小板膜表面有许多糖蛋白(glycoprotein，GP)分子，作为血液中多种凝血因