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红细胞悬液配制ABORh血型鉴定讲稿
实验一 ABO、Rh血型鉴定
【实验】【实验原理】
【】【】【】【实验步骤】
3. 配制不同浓度的红细胞悬液
悬浮RBC浓度 20% 10% 5% 2% 1% 压积RBC(滴d) 1d 1d 1d 1d 1d NS 0.2ml(4d) 0.4ml(8d) 0.8ml(16d) 2ml(40d) 4ml(80d)
悬浮RBC浓度 3% 2% 1% 10%RBC悬液 1d 1d 1d NS (滴) 约3(d) 4(d) 9 (d)
二、ABO血型鉴定
【实验】【实验原理】
已知血型特异性的抗体试剂鉴定红细胞的抗原[正定型、红细胞定型],同时用已知血型的试剂红细胞鉴定血清的抗体[反定型、血清定型],根据正反定型结果判定血型。【实验仪器与试剂】
1.滴管、洁净小试管、记号笔、离心机、显微镜等。
2.试剂 单克隆或多克隆的抗A;单克隆或多克隆的抗B;抗A,B;2%~5%的A型、B型和型红细胞生理盐水悬液。
【实验步骤】
1.正定型(红细胞定型)
(1) 取洁净小试管2支,分别标明抗A、抗B,抗A,B(可选),用滴管分别加入抗A、抗B和抗A,B定型试剂各l滴试管,再分别加入受检者的2%~5%红细胞盐水悬液1滴,轻摇混合。
(2) 以3000rpm(900到1000×g)离心15s。
(3) 轻摇试管使细胞扣悬起观察有无凝集及溶血现象并记录定型结果。
2.反定型(血清定型)
(1) 取洁净小试管3支,分别标明A、B和,用滴分别加入受检者血清2滴于试管,再分别加2%~5%A.、B及型试剂红细胞悬液1滴,混匀。
(2) 以3000rpm(900到1000×g)离心15s。
(3) 轻摇试管使细胞扣重悬后观察有无凝集及溶血现象并记录反定型结果。【实验结果】
AB血型判定应综合正反定型结果,判断方法见表。
抗A血清 抗B血清 A细胞 B细胞 O细胞 血型 + - - + - A - + + - - B - - + + - O + + - - - AB
【】
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