ELISpot技术检测猪抗口蹄疫γ干扰素方法的建立.pdfVIP

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2017-08-28 发布于北京
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ELISpot技术检测猪抗口蹄疫γ干扰素方法的建立.pdf

中国畜牧兽医，（）：２０１７４４１５３-５８ ChinaAnimalＨusbandr &Ｖeterinar Ｍedicine y y ：／ｄｏｉ１０．１６４３１．ｃｎｋｉ．１６７１-７２３６．２０１７．０１．００７ｊ ELIS ot技术检测猪抗口蹄疫干扰素方法的建立 p γ 刘佳，高习习，李巍，程淑晶，李广焱，于汉勋，王钦富１２１１１１２  （大连市动物疫病预防控制中心，大连；大连大学生命科学与技术学院，大连）１．１１６０３７２．１１６６２２摘要：猪口蹄疫免疫防御是控制猪口蹄疫疫情的重要手段，免疫水平指标通常用免疫抗体水平判定。对于其细胞免疫水平检测尚缺乏成熟可靠的技术，本试验利用市售ＥＬＩＳｏｔ试剂盒建立猪口蹄疫特异干扰素检测方法，ｐ γ 刺激物分别采用疫苗全病毒颗粒（／／／）、口蹄疫病毒细胞表位多肽池，以植物血凝素（）为阳ＯＭａ９８ＸＪ２０１０ＴＰＨＡｙ性对照，对细胞浓度、刺激物浓度、孵育时间等进行优化。优化条件为：外周血ＰＢＭＣ新鲜提取或冻存细胞成活率９０％以上，最佳细胞数为２×１０５个／孔，最佳反应时间是，病毒粒子含量为／，多肽最佳浓度１６ｈ１４６Ｓ１００ｎｍＬｇ／，的最佳浓度是／。技术检测口蹄疫病毒感染猪干扰素方法的建立，为口蹄疫１０ｍＬＰＨＡ２０ｍＬＥＬＩＳｏｔ γ μｇ μｇｐ免疫力评价及口蹄疫疫苗免疫效果评估及进一步研究其与疫苗保护力（）的相关性奠定基础。ＰＤ５０关键词：ＥＬＩＳｏｔ；口蹄疫；干扰素ｐ γ 中图分类号：文献标识码：文章编号：（）Ｓ８５２．６５Ａ１６７１-７２３６２０１７０１-００５３-０６ EstablishmentofELIS otTechni ueforDetectin IFN-γ p q g a ainstFootandMouthDiseaseVirus g １２１