中药复方协同顺铂抗卵巢癌的实验探究.pdf

gIof}吓 y 中药复方协同顺铂抗卵巢癌的实验研究 The Effectof HerbalMedicinal Synergistic Compound and PrescriptionCisplatinum against Ovariancarcinoma 博士后姓名 索玉平 指 导 教 师 彭芝兰教授 四川大学临床医学 妇产科学 研究工作起始时问 2002年12月 研究工作期满时间 2005年07月 四川大学(成都) 2005年05月 中药复方协同顺铂抗卵巢癌的实验研究 摘 要 herbalmedicinal 目 的(1)通过观察抗癌中药复方(Compound prescription， CHMPl药血清及其协同顺铂对卵巢癌细胞SKOV3的形态、增殖以及凋亡的影响，试图 建立裸鼠皮下卵巢癌移植瘤模型，观察CHMP协同DDP在活体的抑瘤作用。继)系统观 节与抗化疗骨髓抑制作用机理。(5)从与诱导肿瘤细胞凋亡主要相关的Fas／FasL及 DDP体内外xCsKOV3细胞凋亡相关基因的表达调控。通过以上五部分实验，试图阐述 抗癌CHMP协同DDP抗卵巢癌的确切机制。 方法(1)制备两个补益及解毒化瘀复方(即CHMPl、CHMP2)颗粒药血清： 大、中、小三个不同剂量灌胃给药，对照组给予相同剂量的生理盐水。一次给药后 1h、2h、3h， 二次给药后1h、2h、3h，于无菌条件下自下腔静脉采血，制备不同 培养液配簧，DDP终浓度为2ug／ml(d,剂量)、10u g／ml(中剂量)、20u g／ml(大 增殖的影响。以确定药血清最佳时相及剂量。MTT法测定两药物相互作用指数 橙染色法及DNA琼脂糖凝胶电泳法观察上述各实验组细胞凋亡。(2)制各CD3AK 及rIL．2初始浓度相同。继续作扩增培养，4天后收集备用。使用血清药理学方法． T、 建立裸鼠人卵巢癌细胞株SKOV3皮下移殖瘤模型。通过测定对照组、CHMPI组、 测肿瘤组织凋亡以及HE染色，光镜、电镜下观察肿瘤组织病理(细胞凋亡和坏死)， DDP小鼠(BALB／C) 评价在体内中药复方颗粒协同顺铂抗卵巢癌的作用。(4)腹腔ip 建立免疫抑制模型，分组同上，制备脾细胞，MTT法测定NK细胞杀伤活性。流式 细胞仪检测脾淋巴细胞亚群，HE染色观察脾脏组织的病理学改变，检测外周血自细 胞数，计数骨髓有核细胞数。碳粒廓清法测定小鼠单核细胞的吞噬指数。(5)Western 的表达。 结果(1)CHMP 制作用，药物剂量与抑制作用大小无线性关系，以中剂量抑制作用最好，DDP随 剂量增加，对SKOV3细胞的抑制率增高，以高剂量DDP抑制率最好。故以后