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实验六 巨噬细胞吞噬实验(2学时) 一 实验原理: 巨噬细胞是机体免疫系统中重要的细胞成分之一,其主要的免疫学功能为: 1、吞噬和杀伤作用:组织中的巨噬细胞可吞噬和杀灭多种病原微生物和处理调亡损伤的细胞,是机体非特异性免疫的重要因素; 2、抗原加工和递呈; 3、合成和分泌各种活性因子 二 实验内容: 观察巨噬细胞吞噬鸡红细胞。 三 实验材料与方法 1、材料 实验动物:小鼠,18~22g。雌雄皆可。 吞噬物:2%鸡红细胞悬液 5亿/ml个大肠杆菌悬液 染色液:瑞氏染液 注射器,载玻片,小剪刀,小镊子,滴管,显微镜 2 方法 1)实验前48小时,取小鼠一只,腹腔注射1ml(5亿个/ml)大肠杆菌悬液,以诱导巨噬细胞游离出 2) 48小时后,小鼠腹腔注射2%的鸡红细胞悬液1ml,轻揉腹部,使鸡红细胞分散 4)将小鼠固定在泡沫板上,剪开腹腔,把内脏推向一侧,用吸管吸取腹腔液,滴在载玻片上,加盖玻片。显微镜下观察。 另外,可进行瑞氏染色后用油镜观察 3、结果判定方法: 鸡红细胞被消化程度(染色后): 未消化:鸡红细胞核清晰,着色正常,胞质浅红色或浅黄绿色,胞核紫红色; 轻度消化:鸡红细胞胞质深黄绿色,核固缩,紫红色; 重度消化:鸡红细胞核模糊,核肿胀,染色淡,胞质浅染,胞核呈浅灰黄色; 完全消化:鸡红细胞核溶解,染色极淡,巨噬细胞内只见形状类似鸡红细胞大小的空泡,边缘整齐,胞核隐约可见 未染色的 在高倍镜下,鸡红细胞是一些淡黄色、椭圆形有核的细胞;而数量较多,较大的圆形或不规则的细胞,表面具有许多似刺毛状的小突起(伪足)的即为巨噬细胞 四 实验结果: 将观察到的结果记录下来。 五 实验分析与讨论: * 3)用颈椎脱臼法处死小鼠 *
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