《化工仪器分析》复习内容.docVIP

第一章紫外可见分光光度法 紫外可见分光光度(UV-Vis)是基于物质分子对200-780nm区域内光辐射的吸收而建立起来的分析方法。 一、紫外-可见分光光度法分类 1、目视比色法（由于欠准确，已不广泛使用） (2)测定方法 测定方法有标准色阶法、比色滴定法。 a、标准色阶法 b、比色滴定法 分光光度法 应用分光光度计，根据物质对不同波长的单色光的吸收程度不同而对物质进行定性和定量分析的方法。 （1）可见分光光度法（400—780nm） （2）紫外分光光度法（200—400nm） (3)红外分光光度法(～nm) 紫外、可见分光光度法的特点： 灵敏度高 2、准确度较高 3、操作简便、分析速度快 4、应用广泛 二、基本原理 （一）物质的颜色与光有密切关系。 1、光的基本特性 A、电池波谱 光是一种电磁波，具有波动性和粒子性。 单色光和互补色 具有一种波长的光称为单色光，含有多种波长的光称为复合光。 凡是能被肉眼感觉到的光称为可见光(visible light)。其波长范围：400-780nm。在可见光区内，不同波长的光刺激眼睛后会产生不同颜色的感觉，即具有不同的颜色， 如果把适当颜色的两种光按一定强度比例混合，也可以得到白光，这两种颜色的光称为互补色光。 学习并掌握：光色互补示意图。 （二）物质对光的选择性吸收 1、物质颜色的产生 当一束白光照通过某透明溶液时，若某溶液选择性地吸收了可见光区某波长的光，则该溶液呈现出被吸收光的互补色光的颜色。 例如：KMnO4（呈紫红色？），K2CrO4(呈黄色？) 2、物质的吸收光谱曲线 以波长（λ）为横坐标，以吸光度为纵坐标做图，可得一曲线，这曲线称吸收光谱曲线。（它描述物质对光的吸收程度） 3、吸收光谱曲线产生机理 在实际定量分析中，待分析物一般都是混合物，其中以溶液为主。因此，溶剂效应对物质吸收带影响是个很重要的问题，特别是紫外区的吸光谱。溶液中的吸收光谱和物质气态光谱是不同的，在非极性溶剂中所得的光谱接近于气态光谱。而极性溶剂对溶质吸收光谱的影响极大。下图可以明显显示出溶剂效应，庚烷极性小，其吸收光谱改变少，而乙醇极性大，吸收光谱产生了重要改变。这点对临床检验工作有重要影响。例如：NADH是检验工作中常用的底物，要计算K值时要用水溶液的吸光系数，而不要用其他体系的吸光系数。 三、朗伯-比尔定律 当一束平行的单色光通过均匀而透明的溶液时，一部分光被溶液所吸收，因此透过溶液的光通量就要减少。设入射光通量为Φ0，通过溶液后透射光通量为Φtr，则比值Φtr/Φ0表示溶液对光的透射程度称为透射比，符号为T(或τ)，其值可以用小数或百分数表示： T(或τ)=Φtr/Φ0 透射比倒数的对数表示溶液对光的吸收程度，称为吸光度，用A表示。 A=lgΦ0/Φtr =-lg 当入射光全部透过溶液时Φtr＝Φ0。τ=1（或100%），即A=0；当入射光全部被溶液吸收时，Φtr=0，=0，即A→∞。 1、朗伯（Lambert）定律 推导得出： Ａ＝Ｋ1b 上式为朗伯定律的表达式。 2、比尔（Ｂeer）定律 推导得出： Ａ＝Ｋ2C 上式为比尔定律的表达式。 比尔定律只适宜于一定的浓度范围。 3、朗伯-比尔定律 物质对光的选择性吸收遵守光的吸收基本定律――朗伯－比尔定律。 理论推导和实践都证明：当一束平行单色光垂直入射通过均匀、透明的吸光物质的稀溶液时，溶液对光的吸收程度与溶液的浓度及液层厚度的乘积成正比。 即： （ ） 式中　b－吸收池内溶液的光路长度，cm； c－溶液中吸光物质的浓度， K－吸光系数。 4、摩尔吸光系数（ε） 当溶液的浓度以物质的量浓度（mol.L-1）表示，光程长度以厘米（cm）表示时，相应的吸光系数称为摩尔吸光系数，以ε表示，其单位为L.mol-1.cm-1。 此时，朗伯-比尔定律改写成： 紫外-可见分光光度计的主要部件 紫外-可见分光光度计的主要部件包括光源、单色器、吸收池、检测器及测量显示系统。 1、光源（1）可见光光源 钨灯 （2）紫外光光源（多为气体放电源） 氢灯、氘灯(重氢灯)或氙灯 2、单色器 单色器是将光源发出的连续光谱按照波长的长短顺序分散为单色光，并能准确方便地“取出”所需的某一波长的光的装置。 获得单色光的元件有滤光片、棱镜和光栅, 紫外可见分光光度计的色散元件,目前主要采用棱镜和光栅。 棱镜 （2）光栅 吸收池（又叫比色皿，用于盛装试液和参比溶液） 比色皿一般为长方形。有各种规格， 比色皿使用注意事项 检测器 对透过吸收池的光做出响应，并把它转变成电信号输出，其输出信号大小与透过光的强度成正比。 分光光度计中的光电转换元件有硒光电池、光电管、光电倍增管。 5、信号显示器（检流计标尺） 测量的实验数据如透光度T、吸光