三苯氧胺增强斑蝥素及其衍生物抗胰腺癌细胞增殖机制的研究.pdf

三苯氧胺增强斑蝥素及其衍生物抗胰腺癌细胞增殖的机制研究 中文摘要 三苯氧胺增强斑蝥素及其衍生物抗胰腺癌细胞增殖的 机制研究 中文摘要 目的 本研究试图阐明三苯氧胺（Tamoxifen，TAM ）作为PKC （Protein Kinase C ， 蛋白激酶C ）抑制剂，通过抑制斑蝥素（Cantharidin ，CAN ）及其衍生物去甲斑蝥素 （Norcantharidin ，NCTD ）所引起的PKCα 的磷酸化表达，以增强斑蝥素及其衍生物 抗胰腺癌细胞增殖的作用。 方法 1. 通过四甲基偶氮唑盐比色法（MTT 法）检测不同浓度Tamoxifen、Cantharidin 及Norcantharidin 对胰腺癌细胞系 PANC-1，BxPC-3，CFPAC-1，Capan-1，PL-45 ， SW-1990 增殖能力的影响；检测 Tamoxifen 分别联合 Cantharidin、Norcantharidin 对 胰腺癌细胞系PANC-1，BxPC-3，CFPAC-1，Capan-1，PL-45 ，SW-1990 增殖能力的 影响；检测Tamoxifen 联合PKC 抑制剂对胰腺癌细胞系PANC-1，BxPC-3，CFPAC-1， Capan-1，PL-45 ，SW-1990 增殖能力的影响。 2. 通过逆转录-聚合酶链反应 （RT-PCR 法）检测六种胰腺癌细胞系的雌激素受 体 （estrogen receptor，ER ）的mRNA 表达情况； 3. 通过Western blot 法检测Tamoxifen、Cantharidin 及Norcantharidin 分别对胰腺 癌细胞PKCα 表达的影响；检测Tamoxifen 分别联合Cantharidin、Norcantharidin 对胰 腺癌细胞PKCα 表达的影响。 结果 1. Tamoxifen 抑制胰腺癌细胞系PANC-1，BxPC-3，CFPAC-1，Capan-1，PL-45 ， SW-1990 细胞增殖，呈剂量和时间依赖效应，并与细胞的ER 表达无关。 2. Cantharidin 及Norcantharidin 可显著抑制胰腺癌细胞系PANC-1，BxPC-3， CFPAC-1，Capan-1，PL-45 ，SW-1990 的增殖能力，呈剂量和时间依赖效应。 3. Tamoxifen 联合Cantharidin、Norcantharidin 可以增强Cantharidin、Norcantharidin 对胰腺癌细胞增殖能力的影响，并呈时间依赖效应。 I 中文摘要 三苯氧胺增强斑蝥素及其衍生物抗胰腺癌细胞增殖的机制研究 4. Tamoxifen 可抑制胰腺癌细胞PKCα 的磷酸化，而对PKCα 总蛋白表达无影响。 5. PKC 抑制剂可削弱Tamoxifen 抑制胰腺癌细胞增殖的能力,呈时间依赖性。 6. Cantharidin 及Norcantharidin 可促进胰腺癌细胞PKCα 的磷酸化，而对PKCα 总蛋白表达无影响。 7. Tamoxifen 可以削弱Cantharidin、Norcantharidin 引起的胰腺癌细胞PKCα 的磷 酸化表达水平，而对PKCα 总蛋白表达无影响。 结论 本研究证实三苯氧胺、斑蝥素、去甲斑蝥素分别对六种胰腺癌细胞的增殖 有抑制作用，呈时间与剂量依赖性；并且三苯氧胺预处理六种胰腺癌细胞后，可以增 强斑蝥素与去甲斑蝥素抗胰腺癌细胞增殖的作用，呈时间依赖性，其作用机制可能为 三苯氧胺削弱了斑蝥素及去甲斑蝥素引起的胰腺癌细胞PKCα 的磷酸化水平。 关键词 胰腺癌；斑蝥素；去甲斑蝥素；PP2A ；三苯氧胺；PKC 作 者 ：解 昕 指导教师 ：陶 敏