yigp大肠杆菌生长所必需的基因.pdfVIP

Vol . 37 No. 4 ( ) 453 201108 Journal of East China U niversity of S ien e an d T e hnology ( Natural S ien e E dition) : 2011) y igP 李 月, 傅 楠, 叶 江, 张惠展 ( 华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室, 上海200237) :y ig P 基 在大肠杆菌基 组上位于辅酶Q 生物合成相关基 ubiE 和ubiB 之间, 3 者 构成 一个操纵子利用温敏质粒pM AK705 系统敲除大肠杆菌基 组上的y ig P 基 后, 发现二 次重组子内的温敏质粒无法通过高温培养丢失, 即染色体上的y ig P 基 被敲除后, 必须依靠质粒 上完整的y ig P 基 才能存活; 通过功能回补y ig P 基 的表达质粒pLa y ig P 后, 温敏质粒可以 丢失; 而将y ig P 基 分段获得的亚克隆回补y ig P 基 缺陷株, 发现其下游367 bp 的y ig PP4P2 片段足以回补染色体上y ig P 基 的功能缺陷, 从而表明y ig P 是大肠杆菌生长所必需的基 , 且 最小功能片段等于甚至小于367 bp : y ig P ; 大肠杆菌; 基 敲除; 功能回补 : Q74 : A y ig P An Essential Gene for Escherichia col i Growth L I Yue, F U N an, YE J iang , ZH A N G H uiz han ( S tat e K ey L aborator y o B ior eactor Eng inee ring , East China Univ er s ity o S cience and T echnol ogy , S hang hai 200237, China) Abstract: The y ig P gene is lo ated betw een ubiE and ubiB gene w hi h on erned CoQ biosynthesis pro ess of Escher ichia coli . T hese thr ee genes are trans r ibed as an operon. After ina tivation of the gene y ig P lo ated at hromosome by the sy stem of temperatur esensitive plasmid pM AK705, w e found that the temperatur esensitiveplasmid in subre ombinant ouldnt be lost at high temperature ultivation. In other w ords, kno kout y ig P of hromosome ould ause Escher ich ia col i ( E. coli) inviability only w hen it had omplete y ig P in plasmid. Through anapleroti experiment w e found that both pLa y ig P and the DNA fragment y ig PP4P2 ould transfor m into the y ig P gene defi ien y var