《植物组织培养》.pptVIP

基础知识 （一）植物组织培养的基本过程 （二）影响植物组织培养的因素 不同的植物组织 同一植物的不同材料 营养、环境条件 植物激素 制备MS固体培养基 1、配制母液 2、配制培养基 3、灭菌 外植体消毒 接种 培养 移栽 栽培 结果分析与评价 （一）对接种操作中污染情况的分析 （二）是否完成了对植物组织的脱分化和再 分化 （三）是否进行了统计、对照与记录 （四）生根苗的移栽是否合格 基础知识 （一）被子植物的花粉发育 1、被子植物的花的结构是怎样的？ 2、观察下图，和减数分裂比较，你能指出对应的时期吗？又有何特点？ 关于被子植物花粉发育的说法，不正确的是（ ） A、花粉粒是在花药中的花粉囊里形成的 B、被子植物精子的形成是直接减数分裂的结果 C、被子植物的花粉的发育要经历四分体时期、单核期、双核期等阶段 D、花粉粒在发育过程中，核先位于细胞一侧，再移到细胞中央 （二）产生花粉植株的两种途径 （三）影响花药培养的因素 1、材料的选择 不同植物 同一植物的不同生理状况（花期早期－初花期） 合适的花粉发育期（单核居中期与靠边期之间） 2、培养基的组成 为什么花瓣松动会给材料的消毒带来困难？ 答：花瓣松动后，微生物就可能侵入到花药，给材料的消毒带来困难。 实验操作 一、材料的选取 1、选择花药一般通过镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期。 2、确定花粉发育时期最常用方法：醋酸洋红法；焙花青－铬矾法。 注：花粉细胞核内有染色体，染色体主要由DNA和蛋白质组成，醋酸洋红为碱性染色剂，染色体容易被染色。通过染色，可以确定细胞核为单核期还是双核期，是单核居中期还是单核靠边期。 课后习题： 1、F2代紫色甜玉米的基因型组成可能为Aasusu或AAsusu。如果运用常规育种方法，将F2代中的紫色甜玉米分别自交，分别收获紫色甜玉米种子后再分别种植，F3不发生性状分离的即为基因型为AAsusu纯种紫色甜玉米。但这种方法比较繁琐，耗时较长，需要至少三年的选种和育种时间。如果利用花药离体培养的技术，在F1代产生的花粉中就可能有Asu的配子组合，再将花粉植株进行秋水仙素处理，使染色体加倍，就可以直接得到紫色甜玉米的纯合体（AAsusu）。这种方法可以大大缩短育种周期。 2、植物组织培养技术与花药培养技术的相同之处是：培养基配制方法、无菌技术及接种操作等基本相同。两者不同之处在于：花药培养的选材非常重要，需事先摸索时期适宜的花蕾，花药裂开后释放出的愈伤组织或胚状体也要及时更换培养基，对培养基配方的要求更为严格。这些都使花药培养的难度大为增加。 植物的组织培养技术 实验操作 月季的花药培养 BD 练 习 花药中的花粉 花药中的花粉 胚状体 愈伤组织 丛芽 丛芽 生根 移栽 此外，植株生长条件、材料低温预处理、接种密度等 三、接种和培养 二、材料的消毒 通常先将花蕾用体积分数为70%的酒精浸泡大30秒，立即取出，在无菌水中清洗。取出后再用无菌吸水纸吸干花蕾表面的水分，放入质量分数为0.1%的氯化汞溶液中2-4分钟（也可1%的次氯酸钙或饱和漂白粉溶液），取出后再用无菌水冲洗3-5次。 四、结果分析与评价 1、能够通过镜检找到处于适宜的发育期的花粉。用醋酸洋红法或焙花青－铬矾法检测单核靠边期的花粉粒。 2、花药出现污染的原因： （1）消毒不彻底；（2）接种室污染； （3）人为因素的交叉污染等。 * * 专题3 植物组织培养 一、基础知识 课题1： 菊花的组织培养 1、植物的组织培养 （1）细胞的分化 ①概念： 在个体发育中，相同细胞的后代在形态、结构、生理功能上发生稳定性差异的过程 （3）植物组织培养 细胞离体 ①必要条件： 一定的营养物质、激素和其他外界条件 ②原理: 细胞的全能性 外植体：从活植物体上切下进行培养的那部分组织或器官 ③相关概念: 脱分化：由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程。 再分化：脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，又可以重新分化成根或芽等器官，这个过程叫再分化。 愈伤组织:细胞排列疏松而无规则,是高度液泡化的、成无定形状态的薄壁细胞 2、影响植物组织培养的因素 （1）植物材料的选择 烟草和胡萝卜的组织培养较为容易 枸杞愈伤组织的芽诱导比较难 同一植物材料的年龄、保存时间的长短会影响实验结果 菊花的组织培养一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝 （2）不同的离体组织和细胞对营养、环境等条件的要求相对特殊，需配置不同的培养基 MS培养基主要成分包括： A、大量元素: N、P、 S 、 K、Ca、Mg等 B、微量元素:B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、 Co等 C、有机物、植物激素 讨论：你能说出各种营养物质的作用吗？