细胞电融合构建高效蒽降解重组菌株的研究.PDFVIP

维普资讯 农业环境科学学报 2006，25(增刊)：725—728 JournalofAgro-EnvironmentScience 细胞电融合构建高效蒽降解重组菌株的研究 魏明宝 ，魏丽芳 ，李 军 ，郑先君 (1．郑州轻工业学院材料与化工学院，河南 郑州 450002；2．河南省咨询公司，河南 郑州 450002) 摘 要 ：通过An815与带 EGFP标记的铜绿假单胞菌(Pseudomonasnen nos。／EGFP)原生质体电融合 ，得到一株融合子R2，该融合 子不仅具有An815菌高效降解蒽的能力，而且具有铜绿假单胞菌产生生物表面活性剂的能力，在72h内将蒽从 100mgL· 降解至 27．9mg·L～。降解能力比出发菌An815提高了22％。 关键词：细胞融合；蒽；生物降解；生物表面活性剂 中图分类号：X172 文献标识码 ：A 文章编号：1672—2043(2006)增刊一0725—04 ConstructionofGeneticRecombinationBacterium CapableofHigh-EffectivelyDegradingAnthracenebyCell Electrofusion WEIMing—bao，WEILi-fangI,LIJun，ZHENGXian-jun f1．CollegeofMaterialsScienceandChemicalEngineering．ZhengzhouInstituteofLightIndustry，Zhengzhou450002， China；2．Henan ProvinceConsultationCo．，Zhengzhou450002，China) Abstract：ThoughprotoplastsofAn815andPseudomonasoeruginosalEGFPelectrofusion，fusantR2wereob~inedinourlaboratory．Wehave f0undthatthefusantR2werecapableofnotonlydegradingpolycyclicaromatichydrocarbons(PAHs)ofAn815，butalsoproducingabio— surfactantofPseudomonasaeruginosa．In72hduration．anthracenewasdergadedfrom 100mg·L～to27．9mg·L一accordingtoatestdonein ourlab．Furthermore．thecapabilityofthesurfactantfordegradinganthracenewasfoundtobe22％ thanthatofAn815． Keywords：cellelectmfusion；anthracene；biodergadation；biosurfactant 有机化合污染物多环芳烃 (PolycyclicAromatic 从固相转移到水相，促进了多环芳烃的生物利用率。 Hydrocarbons，PAHs)中蒽广泛分布于环境中，具有结 生物表面活性剂乳化能力高且无二次污染．已得到广 构稳定、难生物降解的性质，且有致癌、致畸、致突变 泛关注_4、51。 特 ，是一类优先控制污染物_l1。环境中许多细菌、真 细胞融合的方法有化学法即利用 30％聚乙二醇 菌及藻类都具有降解蒽的能力_2l，其中从石油污染土 (PEG)(M=4ooo)，经蒸馏后配成高渗液使用，在两种亲 壤筛选的蒽降解菌An2是蒽高效降解菌，经过N+离 本原生质体中加入30％聚乙二醇高渗液 5min后离 子注入诱变后得到的突变株An815降解能力更强。 心去除PEG置于再生培养基。物理法即利用电脉冲， 高分子量的多环芳烃(蒽)由于其 自身的结构和特性， 促使原生质体合二为一，电融合的融合率较高。细胞 在环境中较稳定，降解效果并不十分理想3J【。铜绿假单 电融合由于融合频率高、融合迅速和毒害小的优点被 胞菌能产生生物表面活性剂，降低多环芳烃在环境中 广泛应用同。 的毛细管张力和提高其在水中的溶解性 ，使多环芳烃 通过对An815菌和铜绿假单胞菌进行