微囊藻毒素的提取及其生物降解研究.docVIP

微囊藻毒素的提取及其生物降解研究 水质下降、水体环境污染和富营养化问题日趋严重，特别是蓝藻水华问题在淡水湖泊的频繁爆发，已引起全球的关注。在蓝藻死亡后，其细胞裂解，并向环境介质中释放多种不同类型的微囊藻毒素(MCs)，对人类产生危害。因此需要建立快速、灵敏、稳定、高效的方法对环境介质中的微囊藻毒素进行定性、定量分析。同时，需要进一步研究其生物降解机理，对已爆发蓝藻问题的水域进行治理。本论文在比较有关研究蓝藻、微囊藻毒素研究的基础上，进一步验证和探究微囊藻毒素MC-LR的提取、纯化以及分析检测条件。优化了固相萃取(SPE)结合高效液相色谱法(HLPC)分析水中的MC-LR的方法，主要确定了20%的甲醇为淋洗液、含有0.06%三氟乙酸(THF)的纯甲醇为洗脱液的MC-LR的SPE提取条件。并初步探究了漆酶、锰过氧化物酶对不同浓度MC-LR的降解作用。8110 关键词微囊藻毒素、固相萃取、高效液相色谱、锰过氧化物酶 TitleStudy on the extraction and biodegradation of microcystins Abstract The deterioration of water quality,serious environmental pollution and eutrophication of water, especially the high frequency of algal bloom in freshwater lakes, has attracted global attention. After the death of the cyanobacteria, the cells split and release various types of microcystins (MCs) to the environmental media, which are harmful to human beings. Therefore, itrsquo;s needed to establish a rapid, sensitive, stable and efficient method for qualitative and quantitative analysis of MCs in environmental media. At the same time, a furtherstudy on itsbiodegradation mechanism is required, which is used for controlling algal bloom in lakes. On the foundationof the studies available on cyanobacteria and MCs,the 3.3.2实验仪器13 3.2.3MC-LR的分析检测 . 13 3.4漆酶对MC-LR的降解15 3.4.1实验材料15 3.4.2降解实验15 3.5锰过氧化物酶对MC-LR的降解16 3.5.1实验材料16 3.5.2降解实验16 4结果与讨论..16 4.1淋洗液浓度的选择. 16 4.2洗脱液浓度的选择. 18 4.3三氟乙酸(THF)浓度的选择.. 19 4.4漆酶对不同浓度的MC-LR的降解.. 19 4.5MnP对不同浓度的MC-LR的降解. 20 结论22 致谢23 参 考 文 献 ..24 1绪论 近些年来，由于许多自然和人为因素的影响，排入湖库的氮、磷等营养物质 不断增加，致使水体富营养化状况加剧，进而导致各地水体蓝藻水华的暴发越来 越频繁，规模也越来越大。严重的水华会覆盖水面，阻止水体中的光合作用及其 与大气的交换，使水中的溶解氧浓度迅速降低，造成水生动植物的死亡以及生态 和周边环境的破坏。这些影响又进一步对周边城市的政治经济产生严重破坏，如 投资业、水产业、旅游业。同时，藻华常使水体中的藻毒素含量严重超标，这些 藻毒素也是肝脏肿瘤等疾病的强诱发剂，严重威胁着人体健康和饮用水安全。本 章参考了相关研究以及报道，主要介绍了蓝藻水华污染的现状、爆发、危害和防 治，同时简述了微囊藻毒素的研究进展，为进一步研究微囊藻毒素提供了较为深 入的理论基础。 1.1蓝藻水华的现状、危害及防治 ，导致水生浮游动物、鱼类以及水生植物因缺氧或中毒而死亡。 (2)危害人类及其它动物的健康。蓝藻能产生各种各样的天然毒素，主要是 环肽、生物碱和脂多糖内毒素，上述毒素的致毒类型包括肝毒性、神经毒性、遗 传毒性、皮炎毒性等[4] ，其中以肝毒性的微囊藻毒素危害最大。另外在水生动物 体内积累的藻毒素包括鱼、贝和浮游动物等，有可能通过食物链的累积效应