花鲈的染色体核型研究.doc

花鲈的染色体核型研究 孙 凤 霞 ( 河南科技学院动物科学系， 新乡 ，453003 ) 摘 要 : 方法：采用秋水仙素腹腔注射，空气干燥法制备花鲈的中期染色体。结果表明：花鲈染色体是二倍体，数目为2n=48，核型公式为:2n=1m+1sm+46t, 染色体总臂数（NF）=50。结论：不同产地的花鲈核型之间存在差异。 关键词 : 花鲈 染色体 核型 染色体是遗传的物质基础，研究染色体数目、核型有助于了解该种生物的遗传组成，遗传变异规律和发育机理，同时对于丰富物种遗传学和分类学内容，探究物种起源及进化地位的确定，指导遗传育种生产实践有着重要的意义[1]。 鱼类染色体核型分析是细胞遗传学研究的一项基础工作，早在本世纪三十年代就已开始了对鱼类染色体的研究。在现有的2.5万种鱼类中，Ojima报道了430种,Bасиль?в报道了1076种（包括亚种）,李树深报道了1114种（亚种）鱼类染色体研究的结果[2]。鲈形目鱼类大约有7800种(Nelson,1984),已进行过染色体研究的种类有400多种(小岛吉雄，1983)[3]。我国从上世纪70年代开始开展了此方面研究，到目前为止，有关鱼类染色体核型已有很多研究，尤锋等[1]，尹洪滨等[2]，王金星等[3]，喻子牛等[4]对不同鱼类的染色体都有相关报道。 本文拟对鲈形目(Percifoms)、酯科(Serranidae)、花鲈属(Lateolabrax)、花鲈(Lateolabrax japonicus)的染色体核型进行分析，以丰富鱼类遗传学和分类学内容，为酯科鱼类种质资源的利用和保护提供基础资料。 1 材料和方法 1. 1 实验材料 实验用鱼于2004年5月购自新乡市场，共计6尾，2雌4雄，体重450g～560g。 1. 2 方法 1. 2. 1 染色体制备 参照林义浩[5]的方法并加以改进。具体步骤如下：按3ug/g体重的剂量腹腔注射秋水仙素(浓度为0.1%)，3.5h后剪鳃放血取出头肾。在生理盐水中洗涤，尽量去除脂肪和结缔组织等杂质，研磨，取上清液，1000r/min离心10min, 去除组织块，加入0.05mol/L的KCL，37℃低渗30min。随后1000r/min离心10min，弃去上清液，加入新配制的Carnoy液（甲醇：冰醋酸=3：1）固定15min 后再离心，再重复固定并离心2次。最后一次固定并离心后，弃去上清液，加入适量固定液，制成悬液并滴于预先冰冻过的载玻片上。空气干燥后用Giemsa液（用PH=6.8的磷酸缓冲液以1：9稀释）染色，二甲苯透明，中性树胶封片，烘干后镜检。 1.2.2 记数与测量 选取清晰的染色体中期分裂相进行染色体数目统计，确定二倍体染色体众数。选择5个较好的中期分裂相显微摄影，经放大后测量，算出每一条染色体的相对长度、臂比，2者数据相近的配成一对，按相对长度分组编号。染色体分析按Levan[6]等人的方法确定。 2 结果 2. 1 染色体数目 花鲈染色体数目的统计结果见表1，从表中可以看出：花鲈二倍体染色体数目的众数是48，即2n=48。 2. 2 花鲈染色体核型 花鲈染色体的中期分裂相形态清晰、着丝点易于辨认。测量、计算的结果采用Levan的命名和分类标准[6]，得出花鲈染色体的相对长度和臂比（未发现有异型染色体和随体染色体），见表2。花鲈染色体中期分裂相和核型见图1，再依照核型分析参数做出染色体核型模式图（图2）。根据以上结果得出：花鲈的核型公式为：2n=48=1m+1sm+46t ,总臂数NF= 50。 表1 花鲈二倍体染色体数 Table 1 Frequency distribution of diploid chromosome counts in Lateolabrax japonicus 染色体2n分布数目 Diploid chromosome counts 合计 Total 42 43 44 45 46 47 48 细胞数 2 1 6 2 10 3 76 100 number of cell 众数频率（%） 2 1 6 2