膜生物反应器及其在酶法制备手性氨基酸中的应用的分析研究.pdfVIP

摘要 f膜生物反应器是七十年代后期在生物化工和膜分离技术的基础上发展起来 的新型反应器，它是膜技术应用史上革命性的发展。作为生物反应分离耦合过程 的一个具体应用，膜生物反应器有其不可比拟的优越性，如可实现连续操作；酶 可重复利用：通过反应分离耦合，可降低反应液中产物浓度，从而消除产物抑制； 有效地富集产物浓度等等。这些优点决定了它在生物工程上应用前景越来越广 阔。 近年来，国内外学者为提高膜组件的处理能力和运行稳定性，对合适的操作 条件与工艺参数进行了详尽的研究；同时探索了不同生物处理工艺与膜分离单元 的组合形式，扩大膜生物反应器的应用范围。但这些研究大多数是关于将膜生物 反应器应用在废水处理或用于细胞培养即发酵过程，而膜生物反应器在酶转化过 程中的应用还是个崭新的课题。本文将无机膜生物反应器运用于酶转化生产有光 学活性的氨基酸过程中，探索一种完全意义上的新型设备及其在生物工程中的应 、，7 用。rr ， 本文分析了两种典型的手性氨基酸酶法制备方法，即以大肠杆菌突变株所产 生的天冬氨酸转氨酶制备L．苯丙氨酸体系和利用用假单胞菌所产生的海因酶制 备D．对羟基苯甘氨酸体系。由于以上转化体系均存在酶重复利用率低、反应中 都存在着底物或产物抑制等不足，使得酶转化成本过高和酶转化效率偏低。 本文针对以上两种酶法制备手性氨基酸体系，对膜生物反应器的运用开展了 研究： 设计了外置式无机膜生物反应器，研究了膜的通量衰减曲线，考察了温度， 真空度、气体循环速度、液体循环速度等多种因素对膜通量的影响，优化了该膜 生物反应器中膜操作条件：并研究了温度、pH值、料液浓度对膜污染的影响； 考察了化学清洗膜污染方法并进行评价，确定了最佳清洗条件。侈次清洗后清水 通量均可恢复到新膜98％以上；考察了两种物理方法恢复膜通量的能力并评价， 发现无论松弛法还是气体脉冲反冲洗法都能使膜的渗透通量得到一定程度上的 恢复。厂7 进行了该反应器的传质性能的研究，归纳出该反应器的空隙率及传质系数和 搅拌功率及表观通气速度的函数关系，发现该反应器传质性能较好。 研究了天冬氨酸转氨酶间歇反应制备L-苯丙氨酸的动力学，建立了其动力 学模型f以109／L、309／L、509／L三种底物浓度做间歇转化反应后进行模拟，比 较模拟结果和实验值；模型结果和实验值能很好的吻合。在间歇反应基础上建立 了膜生物反应器中天冬氨酸转氨酶的连续反应过程的动力学模型；考察了连续操 作时的关键操作因子稀释率，确定了最佳起始循环底物浓度：然后以309／L底物 浓度和509／L底物浓度进行了连续转化，并将其与数学模拟结果相比较，探导酶 的失活对连续反应的影响，实验证明是酶活本身的稳定性影响了转化率的进一步 提高，而反应器工作正常。最终以50∥L浓度的底物进行的转化转化率可达 62．2％，可转化相当于间歇反应时等量酶所转化的3倍多底物；以309／L浓度的 底物进行的转化转化率可达到75．42％，可转化相当于间歇反应时等量酶所转化 的4倍多底物。户7矿一 ／ 考察了DL-对羟基苯海因的溶解动力学特性、海因酶酶解动力学以及N一氨 甲酰基一D一氨基酸酰胺水解酶酶解动力学：考察了物质在细胞膜上的传质过程对 酶转化的影响。(说明细胞膜上的传质对酶反应有一个不明显的滞后过程；在这些 实验基础上初步建立了复杂酶间歇转化的全过程的动力学方程，求解模型，理论 值和实验值较为吻合；在间歇反应实验及理论的基础上建立连续酶转化过程的动 力学模型，求解模型，比较理论值和实验值，两者相似性很好。最终可转化相当 于间歇反应时等量酶所转化的4倍多底物，且底物转化率99％以A，产物收率能 达到75％左右。p 关键词：膜生物反应器)手性氨基酸，天冬氨酸转氨酶．海因酶，N．氨甲酰基一D． 氨基酸酰胺水解酶 II andits Oil bioreactor membrane on application Study