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原位杂交实验方法 mRNA 原位杂交前实验准备 1，无RNA酶水的处理 2，无RNA酶载玻片的处理 3，标本的防RNA酶的固定 4，探针的稀释和保存 5，DNA探针需变性 原位杂交溶液的配制 1，预杂交液和杂交液的配制 2，20Xssc， 2Xssc， 0.2Xssc缓冲液的配制 3，0.1mol PBS缓冲液的配制 4，0.1mol 枸橼酸缓冲液的配制 5，0.1mol TBS缓冲液的配制 6，复合消化液的配制 7，组织细胞打孔液的配制 8，杂交漂洗液 9，过氧化氢封闭液 探针设计方案 1，探针名称 ： 2，适用种属： 3，标记方式：3ˋDIG 5ˋFAM 4，模板序列： 5，探针序列： 探针杂交原理 1，组织细胞的通透 2，探针长度 3 , 探针浓度和杂交时间 4，杂交中的Tm值和杂交温度 5，杂交严格度 6，预杂交原理 7，杂交后处理 A-石蜡切片mRNA原位杂交步骤 一，过氧化物酶显色系统 二，碱性磷酸酶显色系统 三，荧光显色方法 B-冰冻切片mRNA原位杂交步骤 一，过氧化物酶显色系统 二，碱性磷酸酶显色系统 三，荧光显色方法 C-细胞爬片或涂片mRNA原位杂交步骤 一，过氧化物酶显色系统 二，碱性磷酸酶显色系统 三，荧光显色方法 附录 1，DAB的配制和使用方法 2 NBT/BCIP的配制和使用方法 3，苏木素的配制和使用方