添加物对发酵法生产D-核糖工艺的优化的分析研究.pdfVIP

添加物对发酵法生产D．核糖工艺的优化研究 摘要 D一核糖是组成生物体内遗传物质核糖核酸的重要成分，也是一些辅酶和维生素的重要 成分，在生理上是十分重要的物质，广泛应用于医药、食品和生命科学研究等方面。近年 来微tk物发酵法生产D一核糖因其生产成本低和产率高而引起国内外越来越多研究者的关 注。本文针对D．核糖发酵体系的特点改进了D．核糖的测定方法，对本发酵体系的菌株进 行了自然选育和化学诱变育种，并在发酵过程中添加不同组分改善D-核糖发酵条件提高 D，核糖产量，最终对添加多组分的培养基进行优化，确定D一核糖的最优培养基，建立了 罐中的发酵动力学模型。 1．改进的D一核糖测定方法应用间苯三酚替代苔黑酚作为助色剂，建立了改进的分光 光度法测定微生物发酵液中D一核糖浓度测定的方法。其操作条件为：最佳的测定波长为 moI／L。发酵液葡萄糖对D- 550ran；合适加热时间为25rain；合适反应氢离子浓度为5．5 核糖的测定影响显著，非葡萄糖组分影响可忽略，得出有葡萄糖影响的间苯三酚法测定 D．核糖的计算公式。 2．化学诱变法选育D一核糖高产菌株以硫酸二乙酯为诱变剂对转酮醇酶缺陷型枯草 芽孢杆菌进行诱变得到了其最佳的诱变条件：诱变时间15rain，诱变剂用量O．8％。通过 对大量的突变株筛选，得到D一核糖高产菌，其D一核糖产量较出发菌株提高81．69％，达到 5．19／IOOmL，具有重要的应用价值。 3胞内产物释放技术对D．核糖生产的影响发酵过程中胞内胞外D一核糖浓度差距很 大，通过向发酵液中添加M一+、青霉素调节细胞膜通透性，其中发酵48h添加浓度为 ix o．039／100mL的Mn”，D一核糖产量可咀提高lO．26％，24h时添加3 g／L青霉素，产量可 提高11．96％。 4发酵液中添加不同组分对D一核糖产量影响以D一核糖生物合成途径及代谢调控为 依据，研究了添加不同的物质于发酵培养基中对D一核糖生产的影响。 化进而可抑制菌体过分滋长，同时使得HMP不完全途径的反应相对增强，促进HMP途径 (3)磷酸对菌体生长产生非常重要的作用，是许多辅酶的组成成分，于发酵液中分别 (4)采用葡萄糖与葡萄糖酸钠为混合碳源，于发酵的不同时间添加葡萄糖酸钠解决了 在添加葡萄糖酸钠时遇到的葡萄糖在发酵终期仍大量存在的问题，得出在D．核糖发酵24h 后m发酵液中添加59／100mL葡萄糖酸钠D．核糖产量提高了18．2％。 (5)通过正交方法进行培养基优化确定了D-核糖生产菌株的最佳培养基组分，在该最 优化的培养基下摇瓶中D一核糖产量可稳定在5．S!g／100mL左右。 5．发酵罐中动力学模型的建立在优化培养基的基础上建立了发酵罐中的D．核糖生 产动力学模型，该模型能较好的反映其发酵过程。 关键词：微生物，D-核糖，分光光度法，化学诱变，添加，生长曲线，动力学模型 至垫塑翌茎墅竺兰兰里：堡婪三苎塑些些丝耋——二—————————二—一 D—RIBOSE OF ONOPTIMIZATION STUDY INFERMENTATION TECHNOLOGY BYADDINGSUBSTANCE ABSTRACT isan of and constituent DNA，some D-