二种化合物对二色胡枝子形态分化影响.docVIP

二种化合物对二色胡枝子形态分化影响 　摘　要：本试验以组织培养为试验手段，以二色胡枝子播种得到的无菌苗作为试验材料，以头孢霉素、氯化钠二种化合物为添加剂，设置不同的浓度梯度，分别添加于二色胡枝子子叶节分化、茎段增殖、茎段生根培养基。结果表明：子叶节分化能力大于茎段，较低浓度的化合物对子叶节分化的影响不大，子叶节分化能力随化合物浓度增大而减弱。二种化合物对茎段增殖抑制作用明显，但随浓度变化不明显。二种化合物对茎段生根的抑制作用较子叶节分化、茎段增殖强。 关键词：二色胡枝子； 形态分化； 化合物； 组织培养 1研究目的 　　二色胡枝子(Lespedeza bicolor)隶属豆科(Leguminosae)，是一种多年生落叶灌木。[1]胡枝子具有十分可观的开发利用价值，但耐盐性不强，如果将其进行改良，使其能在盐渍地上生长[2] [3]。本试验旨在利用组织培养的手段，研究不同浓度的头孢霉素(Cef)、氯化钠(NaCl)化合物对二色胡枝子形态分化的影响，找到上述化合物对二色胡枝子形态分化的临界抑制浓度，完成二色胡枝子遗传转化中选择剂的筛选，为耐盐基因转化二色胡枝子做准备工作。 2材料与方法 　　试验材料：材料为二色胡枝子种子，以该种子作为外植体播种萌发的无菌苗的子叶节进行子叶节分化试验，去顶芽茎段进行茎段增殖及生根试验。 　　本试验所用的播种用培养基配方：1/2MS。共同培养基配方：子叶节分化：1/2MS + 6-BA 1.0 mg?L-1 + NAA 0.2 mg?L-1；茎段增殖：1/2MS + 6-BA 1.0 mg?L-1 + NAA 0.1 mg?L-1 + IBA 0.2 mg?L-1；茎段生根：1/2MS + NAA 0.2 mg?L-1 + IBA 0.4 mg?L-1。 　　通过组织培养手段，将不同浓度的头孢霉素(Cef)、氯化钠(NaCl)并分别设置各自浓度为0的对照组，研究这两种化合物对二色胡枝子子叶节分化、茎段增殖、茎段生根的影响。 3数据结果 　　各种植物材料均于接种后30 d统计数据，子叶节分化试验和茎段增殖试验分别统计每种处理中长度在1cm及以上不定芽数量，茎段生根试验统计长度在1 cm及以上的实根数量，子叶节分化试验计算每种处理平均分化出的不定芽的数量，茎段增殖试验计算每种处理平均增殖出的不定芽数量，茎段生根试验计算每种处理平均发生的实根数量。 　　在不同头孢霉素(Cef) 0 mg?L-1、50mg?L-1、100mg?L-1、150mg?L-1、200mg?L-1浓度下胁迫下子叶节分化平均数分别为：6.10，5.55，5.90,4.00,4.55；茎段增殖产生的芽平均数分别为：3.30,1.50,1.10,1.35,1.13；茎段生根的平均数分别为：2.65,1.40,1.90,2.20,1.65。 　　在不同氯化钠(NaCl)0,0.10,0.15,0.20,0.25,0.30,0.40,0.50,0.60,0.70浓度下胁迫下子叶节分化平均数分别为：6.10，—，—，—，—，1.35,1.00,0.30,0.00,0.00；茎段增殖产生的芽平均数分别为：3.30,0.75,0.75,0.35,0.35，—，—，—，—；茎段生根的平均数分别为：2.65,0.40,0.28,0.00,0.00，0.00，—，—，—，—。 4结果分析与讨论 　　头孢霉素(Cef)对二色胡枝子形态分化有抑制作用，但并不明显，相同浓度的头孢霉素(Cef)对二色胡枝子茎段增殖抑制作用大于其对子叶节分化和茎段生根的抑制作用。添加了头孢霉素(Cef)的试验组与未添加头孢霉素(Cef)的对照组比较，子叶节分化出的长度大于等于1cm的不定芽数量、茎段增殖的长度大于等于1cm的不定芽数量、茎段发生的长度大于等于1cm的实根数量均较对照组略少，茎段增殖、生根率也小于对照组。头孢霉素(Cef)在一定程度上抑制二色胡枝子的形态分化。本研究还未试验出头孢霉素(Cef)对二色胡枝子形态分化的临界抑制浓度，仍需进行进一步试验，可以将头孢霉素(Cef)浓度按梯度逐渐增加到600 mg?L-1甚至以上，以试验出头孢霉素(Cef)对二色胡枝子形态分化的临界抑制浓度。 　　氯化钠(NaCl)对二色胡枝子形态分化有抑制作用，此种抑制作用在茎段生根上表现最为突出，当氯化钠(NaCl)浓度达到0.2%时，二色胡枝子茎段已无法生根；当氯化钠(NaCl)浓度达到0.6%时，二色胡枝子子叶节不再分化。茎段增殖试验中，受到较低浓度氯化钠(NaCl)胁迫二色胡枝子植株变得较对照组矮壮，相同浓度氯化钠(NaCl)胁迫下二色胡枝子茎段增殖能力明显大于茎段生根能力，在本试验中，当氯化钠(NaCl)浓度达到0.3%时，二色胡枝子