园林植物挥发物气相色谱实验技术及方法效果综述.docVIP

园林植物挥发物气相色谱实验技术及方法效果综述 　气相色谱的应用领域十分广泛，遍及中药制药、食品工业、环境监测、生物工程等生产生活的各个方面[1]。近年来，该技术在植物挥发物研究领域发展十分迅速，特别是动态顶空气体循环采集法和热脱附-气相色谱-质谱联用技术，是一种采集-吸附-分析相结合的技术。在植物挥发物研究中，全自动化的顶空进样器、气相色谱仪和现代高分辨率的质谱仪联用，具有操作简便、分离效能高、准确性高、节约样品制备时间等优点，可用于近自然状态下植物挥发物的定性分析。 　根据安庆师范学院生命科学学院园林专业课程设置情况，植物学是主干基础学科，且学校十分注重学生实践技能的培养。本实验将以应用性为导向，通过气相色谱实验课学习，使学生进一步巩固园林植物的基础理论知识，并掌握气相色谱检测方法，为学生今后从事园林和科研工作打下坚实基础。 　1 实验原理 　1.1 园林植物挥发物 植物在生长发育过程中释放的分子量小于250，沸点低于340℃的次生代谢物，主要包括萜类、苯基/苯丙烷基和脂肪酸衍生物[2-3]，这些物质的含量相对较低，但其较高的化学活性不仅可增强植物的抗性，影响着我们的生活环境[4]。研究植物释放挥发物的种类和含量，将会最大限度地发挥园林植物的生态功能。 　1.2 气相色谱法 气相色谱法（Gas Chromatography，简称GC），是利用试样中各组份在气相和固定液相间的分配系数不同，将混合物分离、测定的一种分析方法。当汽化后的试样被载气带入色谱柱当中运行时，组份就在其中的两相之间进行反复多次分配，由于固定相对各组份的吸附或溶解能力不同，因此各组份在色谱柱中的运行速度就不同，经过一定的柱长之后，便彼此分离，按流出顺序离开色谱柱进入检测器。特别适用于分析沸点低、含量少的气体和易挥发的液体。 　1.3 质谱法 质谱法（Mass Spectrometry，简称MS），质谱中采用高速电子束撞击气态分子，把电离出的离子加速导入质量分析器中，然后按碎片离子质荷比（m/e）大小的顺序进行收集和记录，即得到质谱图，根据质谱峰的位置可以定性和结构分析，根据质谱峰的相对强度可以进行定量分析。 　1.4 动态顶空分析法 采用惰性气体通入液体样品（或固体表面），把要分析的组分吹扫出来，使之通过一个盛有吸附剂的容器进行富集，然后再把吸附剂加热，使被吸附的组分脱附，用载气带入气相色谱柱中进行分析。适用于从液体或固体样品中萃取出的沸点低于200℃、溶解度小于2%的挥发性或半挥发性有机物。此法对样品的前处理无需使用有机溶剂，对环境不造成二次污染，而且具有取样量少、富集效率高、受基体干扰小、容易实现等在线检测等优点。 　2 实验内容 　2.1 实验课目的 了解动态顶空气体循环采集法与TDS-GC-MS联用技术仪器组成、工作原理及数据采集、数据分析的基本操作。掌握各种数据的计算、气相色谱的定性、定量分析方法，引导学生对各种定量计算方法进行总结。 　2.2 实验材料 玫瑰（Rosa rugosa）属于蔷薇科、蔷薇属植物。它花型优美、花色丰富、芳香馥郁、四季常开，被广泛地用于造景、布置花镜、花坛等，具有很高的观赏价值。还可以用于提炼精油，具有很高的经济价值。 　2.3 实验步骤 　2.3.1 挥发物采集方法 选择晴朗无风的天气，采样时间固定在10：00～11：00，使用微波炉采集袋套在处于盛花期的玫瑰鲜花上，然后在使用大气采样仪（QC-2型）将袋内空气抽成瞬时的真空，再利用采样仪泵入经活性炭过滤后的空气，当袋内气体量达到采样袋体积的3/4时，停止充气，再使用硅胶管连接形成一个闭合回路，接通吸附管采样气体，进行挥发物采集。采集过程中，气体循环流量为100mL/min，采气时间25min，采样重复3次。 　2.3.2 挥发物分析方法 仪器及参数设置参考已发表文献[5]。热脱附系统（TD3型，德国GERSTEL公司生产）工作条件：系统载气压力为20kPa、脱附温度250℃（10min）、进样口温度250℃、冷阱温度-100℃（保持3min）、冷阱进样时温度骤然升温至260℃。 　色谱（7890A型，Agilent公司生产）工作条件：色谱柱为30mtimes;250mu;mtimes;0.25mu;m的HP-5MS柱。程序升温过程为：初始温度保持40℃（保持4min），以6℃/min的速率逐渐上升至250℃（保持3min），再以10℃/min的速率逐渐升至270℃（保持5min）。 　质谱（5975C型，Agilent公司）工作条件：所用的载气为氦气，电离方式为EI，电子能量为70eV。扫描方式：选择离子扫描，质量范围为28～450amu，离子源温度为230℃，接口温度280℃，四级杆温度150℃。 　3 实验结果 　数据处理与质谱检索：